慢病毒包装-磷酸钙法试剂

yuangaoqian

大家好！现在我们想利用磷酸钙法包装慢病毒，需要两种试剂：2MCaCl2和2XHBSS，之前自己配过，但效果不好，所以想请各位帮帮忙，这两种产品是否有商品化的？哪个公司的比较好，最好有货号，非常感谢！

exin11

我们也是自己配置的，还行，主要是hbss的ph值很重要。. F0 ]0 Z7 z/ ]) T

+ |" a: L* ]) I5 A" @补充内容 (2010-11-29 11:25):
) K; d3 r0 a, O6 g, D# H一般为7.2

yuangaoqian

谢谢！我之前配的CaCl2呈黄色，防止一段时间后有黄色沉淀析出，所以不敢用，害怕影响实验进程，所以想买商业化的。

yuangaoqian

exin11，非常感谢，不知可否将你们配制HBSS和CaCl2的具体方法告诉我呀？我看看是否我们的配制过程有问题，谢谢！

cicadacjk

所有试剂都要用进口的，pH要精确到百分位。

exin11

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9 c$ q* J. E9 k" {$ O# b! }
& g6 |$ ?, n8 I* T没问题的，cacl2要求不太高，主要是hbss，cacl2用dpbs溶解，hbss要好好的调一下ph，我之前说的7.2是我们实验室摸索的，不同环境ph要求不一样，要自己做病毒滴度测定。& z9 r( ~5 }- V/ `/ P

5 u' s) v7 Z% P2 g6 S( V% `补充内容 (2010-11-29 17:44):8 B1 Q  [' j! |- }- M
用dpbs溶解11 g CaCl2 .H2O，定容至20 ml。用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成1 ml的小份，贮存于4 ℃。7 X. j* H* K0 ?: X7 w8 r

yuangaoqian

好的，我再试试，非常感谢！

tanguixiang

我做也是用的钙转做的慢病毒，效果还不错，10CM盘制备20ML病毒，可以达到2*10 6  IU/ML
3 ~3 O# a: d: P& I7 ~6 K基本上够用了，试剂都是国产的，PH到7就差不多了，一次配500ML用几年。。。

yuangaoqian

好的，非常感谢大家！

sailor

碧云天的钙转试剂盒用着还可以 但是建议还是用fugene-HD