关于脐带血分离的疑惑，请高手进来

西瓜太郎

The UCB samples were mixed with the Hetasep solution (StemCell Technologies, Vancouver, Canada) at a ratio of 51, and then incubated at room temperature to deplete erythrocyte counts. The supernatant was carefully collected and mononuclear cells were obtained using Ficoll density-gradient centrifugation at 2,500 rpm for 20 min. The cells were washed twice in PBS.! k! E6 D, F( t$ S
疑惑1.Hetasep solution是指的红细胞裂解液么 ？
0 r; c8 ^% s+ k6 P5 C, x( S    2.The cells washed twice in PBS.？需要离心不？转速？1000RPM/M*5MIN ？
8 o) F: G8 P6 I5 T4 C 求高手指点一下！！！- ~2 X" {( u$ X! u3 t7 t$ }' i) y
如果大家有什么好分离的方法，给我顶一下啊 ，自己分离过几次细胞都不怎么样， 谢谢啦2 p8 z. q- ]- J9 b

西瓜太郎

谢谢 各位大虾的指点啊

why121

脐带血培养周期太长 目前还没统一的方法 希望能在此得到提升

robort45

HS是羟乙基淀粉，用于沉降红细胞，与血液的比例是1：5，对细胞无毒无伤害，洗涤当然要离心啊，第一遍1200，第二遍1600。不建议用红细胞裂解液，对细胞有伤害。

痞子的烟头

Hetasep solution 与UCBMIX后可除去红细胞，PBS洗可用1200RPM，上面方案没有问题，当然你也可以采用明胶FICOLL法分离，

luoye1986

我以前见过别人做过，需要离心，转速好像是1400RPM,你试试看行吗。