细胞传代培养法

liqinzhan

9 q+ J" t6 e, f7 W) J1 g$ [1、吸除培养瓶内旧培养液
: B; f; D. p* e4 _2、向瓶内加入0.25%胰蛋白酶，覆满瓶底为限
* d* B# Q/ d& b' t4 W3、置温箱中2--4分钟，（或在室温中把培养瓶放在倒置显微镜下观察）当发现细胞胞质回缩变圆，细胞间隙增大后，立即终止消化（加入胎牛血清）
, F% P; A0 Y7 S* h4 |* p0 I4、吸除消化液，向瓶内注入PBS或NS2ml左右，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉，注意加PBS或NS冲洗细胞时动作要轻柔，以免把已松动的细胞冲流失掉9 R& O6 {+ h: G: h4 G, w+ b
5、用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使细胞从瓶壁脱落，形成细胞悬液，吹打勿用力过猛，以免伤害细胞8 k( z! J: Z/ Q) k0 k
6、把细胞悬液分成等份分装数个培养瓶中，置温箱中培养。