细胞传代培养法

liqinzhan

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1、吸除培养瓶内旧培养液8 ?+ }; K4 L5 L1 V+ t7 \; S& ~7 J
2、向瓶内加入0.25%胰蛋白酶，覆满瓶底为限' M) L+ g6 e7 \2 J" ]; G
3、置温箱中2--4分钟，（或在室温中把培养瓶放在倒置显微镜下观察）当发现细胞胞质回缩变圆，细胞间隙增大后，立即终止消化（加入胎牛血清）4 K# F' W% O. c. |" j% y
4、吸除消化液，向瓶内注入PBS或NS2ml左右，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉，注意加PBS或NS冲洗细胞时动作要轻柔，以免把已松动的细胞冲流失掉
4 }( F) b% J) E! Z5、用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使细胞从瓶壁脱落，形成细胞悬液，吹打勿用力过猛，以免伤害细胞
& r5 c. s- j5 ^6 v9 l8 W& A6、把细胞悬液分成等份分装数个培养瓶中，置温箱中培养。