细胞传代培养法

liqinzhan

2 E' w0 l' y; N/ i1、吸除培养瓶内旧培养液
4 F8 M  a: d) v, L, N: m! ?) D9 A2、向瓶内加入0.25%胰蛋白酶，覆满瓶底为限0 s, J* n+ I% A# C
3、置温箱中2--4分钟，（或在室温中把培养瓶放在倒置显微镜下观察）当发现细胞胞质回缩变圆，细胞间隙增大后，立即终止消化（加入胎牛血清）
# L2 f  s( U& }9 r5 `: d4、吸除消化液，向瓶内注入PBS或NS2ml左右，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉，注意加PBS或NS冲洗细胞时动作要轻柔，以免把已松动的细胞冲流失掉
  C# x* Q! T* S  M+ a% X5、用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使细胞从瓶壁脱落，形成细胞悬液，吹打勿用力过猛，以免伤害细胞
1 e: l' F+ g6 c& `2 W# a9 g6、把细胞悬液分成等份分装数个培养瓶中，置温箱中培养。