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回复 feiyang 的帖子
8 N% \, O4 @8 S) X+ Z4 a% o) t- X; E' U h( w2 K
如果你是从腓骨骨髓里冲出来的BMSCs的话,1、如果组织量较多的话可以先用Ficoll分离液离心一下,具体的操作要点可见360g离心,也可以消化完了之后再离心。2、一定要严格掌握贴壁时间差,利用MSCs比Fibroblast贴壁快,一般2-3小时后立即换液。倒掉没有贴壁的细胞。3、利用低密度培养的方法。MSCs增殖能力强,在很低密度的情况下也能很快增殖。(我试过100mmdish,种48个细胞也能长出克隆来。当然这个每个人养的MSCs有关)。4、就是可以用文献中这种,用0.5ml0.25%胰酶消化2分钟,然后倒掉消化下来的细胞。还是利用MSCs较fibroblast贴壁牢特点。具体见附件中的natrue protocol。希望这些能对你有用。 |
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