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楼主: feiyang
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小鼠骨髓间充质干细胞培养纯度问题     [复制链接]

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楼主
发表于 2011-3-8 19:34 |显示全部帖子
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- |& o- n9 T& S
2 s% H9 M$ C/ B' F  C" [. ]! F! {8 a如果你是从腓骨骨髓里冲出来的BMSCs的话,1、如果组织量较多的话可以先用Ficoll分离液离心一下,具体的操作要点可见360g离心,也可以消化完了之后再离心。2、一定要严格掌握贴壁时间差,利用MSCs比Fibroblast贴壁快,一般2-3小时后立即换液。倒掉没有贴壁的细胞。3、利用低密度培养的方法。MSCs增殖能力强,在很低密度的情况下也能很快增殖。(我试过100mmdish,种48个细胞也能长出克隆来。当然这个每个人养的MSCs有关)。4、就是可以用文献中这种,用0.5ml0.25%胰酶消化2分钟,然后倒掉消化下来的细胞。还是利用MSCs较fibroblast贴壁牢特点。具体见附件中的natrue protocol。希望这些能对你有用。
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沙发
发表于 2011-3-16 22:39 |显示全部帖子
回复 fish_zbw1985 的帖子
3 D( a* m' M" v. [5 s2 b) E4 o+ l: j# b; a& l0 G1 Q
可以啊,但是估计梯度离心估计不行了,其他的还可以用
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