关于提质粒的问题，求助！

crystal

; I9 U# I, g! s  ~; t' a

* H5 W" s7 ]8 r3 e: B  y$ v  [试剂盒OMEGA的，去类毒素中提！
. p/ }& e9 d" y# g昨天没能提出来，很郁闷，也不知道是那步没对！, I- a( M- Q7 }0 _8 \8 s
没提的时候每个人都说非常简单，所以我也就认为一定很简单，照着说明书一步步来就行！( L- k4 k" I2 U; a9 F( h/ T2 |- J
可最后没能提出来，有老师说我第7步出错，正因为大家都说简单，所以做的时候没记笔记，到最后做昏了自己都想不起来了！
. l/ `8 a0 m; i下次一定要把笔记做好！非常重要！2 n7 `- v/ X" O- c' O
不知道有没有用过这个盒子，分享下经验！

daviddow

你在转化的细菌中，最好先挑5个细菌，小提。如果有你的需要的质粒，然后再摇菌，大提。

kostarcell

楼上说的没错，小提你鉴定对了，再大提，记得把小提剩下的菌液放到4度环境，鉴定正确的就直接摇菌，省的转化了。你这种提问的方法不知道你是说自己操作有问题，还是说试剂盒使有问题。

cony

如果菌液经鉴定是正确的话，那么在裂解那一步要注意，液体变清才进行下一步。

siyue13

C萨满，先做小抽呀1 f, R! U4 A* c9 G& ?8 a
常识好吧4 C3 i' L( z  z4 b2 j- k3 j
我妈问候你了

sannia

我前段时间用 Qiagen的大提也是，总是没有pellet。最后我在异丙醇沉淀那一步用过夜就有沉淀了，还有溶液2和3的时候晃动的稍微剧烈一点。

crystal

谢谢大家！

siyue13

QIAGEN的大抽要靠重力往下滴，如果拷贝数低的话是痛苦的，除非有真空泵。不过貌似新的改进过了。大抽还是天根和MN的好用

鹤顶宏

回复 siyue13 的帖子
4 t0 d$ v% W! a+ V5 n( \; ]3 G+ P" d; f% `2 K; ?
可以利用离心机，将柱子放在50ml的离心管直接离心就可以了

l123w456x789

最后溶解少一些 一般说明书要求溶解的体系比较大 你少溶解一些  但也要把沉淀全洗下来  泡个电泳试试看