关于提质粒的问题，求助！

crystal

5 k" j- ^: h+ r9 |3 K, ]1 K

9 ?& p! C% r/ F# @+ `" U* ^8 h试剂盒OMEGA的，去类毒素中提！
: L% |1 ~7 E) t& v5 N, e- _8 w昨天没能提出来，很郁闷，也不知道是那步没对！1 l4 P# {  _- c! H; ~
没提的时候每个人都说非常简单，所以我也就认为一定很简单，照着说明书一步步来就行！0 o$ ]- O/ K% N" I
可最后没能提出来，有老师说我第7步出错，正因为大家都说简单，所以做的时候没记笔记，到最后做昏了自己都想不起来了！
; p# i+ T4 w0 o% p1 |* `下次一定要把笔记做好！非常重要！5 n$ [7 U. n( ~# L1 H7 A, T* d7 e( p
不知道有没有用过这个盒子，分享下经验！

daviddow

你在转化的细菌中，最好先挑5个细菌，小提。如果有你的需要的质粒，然后再摇菌，大提。

kostarcell

楼上说的没错，小提你鉴定对了，再大提，记得把小提剩下的菌液放到4度环境，鉴定正确的就直接摇菌，省的转化了。你这种提问的方法不知道你是说自己操作有问题，还是说试剂盒使有问题。

cony

如果菌液经鉴定是正确的话，那么在裂解那一步要注意，液体变清才进行下一步。

siyue13

C萨满，先做小抽呀# f! d1 c( \8 q1 M) p: X
常识好吧( W* n; m& r  Z  z* n
我妈问候你了

sannia

我前段时间用 Qiagen的大提也是，总是没有pellet。最后我在异丙醇沉淀那一步用过夜就有沉淀了，还有溶液2和3的时候晃动的稍微剧烈一点。

crystal

谢谢大家！

siyue13

QIAGEN的大抽要靠重力往下滴，如果拷贝数低的话是痛苦的，除非有真空泵。不过貌似新的改进过了。大抽还是天根和MN的好用

鹤顶宏

回复 siyue13 的帖子
3 p" r! N( k. G. }3 ~
2 g; B+ m1 J4 m  E+ S可以利用离心机，将柱子放在50ml的离心管直接离心就可以了

l123w456x789

最后溶解少一些 一般说明书要求溶解的体系比较大 你少溶解一些  但也要把沉淀全洗下来  泡个电泳试试看