EB形成过程的问题～

wangzhuo822001

最近做了几次EB都很失败～
" Q" X, m; G* ]. r1 r; W/ {% k具体问题是：1.悬滴三天培养，发觉液滴里面的EB好像都不止一个，而且形态不一，最重要的是感觉有很多不规则形状的像死细胞团的杂质在液滴里面；# N9 P( `) Z7 P7 H
2.把这些液体取下来悬浮，一天后培养基就变得比较浑浊了，感觉里面很多细胞碎片样的东西；+ P! T! f0 t1 H  l' a
3.形成的所谓的EB感觉很松散，悬浮两天后感觉中间都没有密集的细胞，EB也不像EB了～* q* U) {) M- N4 t- i2 P% [- |0 O
郁闷啊～～是不是细胞污染了？又不知道是什么污染～ 0 Q% F4 E/ O6 G% v: W
7 a0 [0 t* `% G) D; b; K( I( j* b
如果ES细胞就已经污染了，哭泣啊～那不是所有的实验都遭了～
. {/ w" r2 y- L0 l+ l4 f  b7 y$ L

st_oliver

回复 wangzhuo822001 的帖子
$ y% G5 Q% ~& i7 v. C/ D, |" o
% p% n9 t+ l0 t+ P) s* {, d, z首先，楼主不要泄气，做实验经常会出现这样的情况，仔细分析找原因。
0 q0 i7 g7 I3 H5 ^: k其次，你的这种情况，我似乎也见过，EB形成的比较松散，不够致密有关，主要原因个人认为是细胞本身的缘故，如果操作什么都没问题的话，松散的话就会有细胞漂出去，单独再形成类EB。) P* |  V2 D8 [6 M/ r
再次，至于你说的污染不污染，根据你的描述，也不一定可以确定，最好是能仔细检查下，要是污染了，就比较不幸了。要及时清查，消除污染源！
1 @3 }2 d  v  V" |5 {) m6 R最后，祝你实验顺利！

nicoleQI

EB的形成和你挑的细胞集落有重要关系的，挑比较致密的集落会长得好一点……