乳腺癌细胞原代培养

fxy805

最近，一直在养乳腺癌原代细胞，可是发现细胞增殖速度很慢，不知道是什么原因。" {; X. ~7 i$ f. \6 l
培养条件是：DMEM-F12,10ng/mlEGF和10ng/mlFGF,2%B27。期间因为细胞生长缓慢试过含10%血清的培养基，效果也不好。不知有人知道问题的症结在哪不，不胜感激！！

深海寂寞鱼

to fxy805:
4 [& e9 `8 v8 I* W2 E* T. s
, }5 k5 Q1 t. n, A6 p/ A    从你的培养基来看，你可能是想从乳腺癌组织中分离培养乳腺癌干细胞，形成肿瘤球。8 R8 S4 C8 M  N4 v. R
9 \7 d, ~. Y, w
    如果是这样的话，乳腺癌原代培养确实长的比较慢。尤其是前几代，两周多能传一次代都算不错了。
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    如果你希望它能长的快点，有几方面可以考虑：2 ^+ x8 T8 [* X. y3 q

5 j5 ?0 h) Y0 L5 x; w    1. 稍微提高EGF和bFGF的浓度至20ng/ml，或者每三天加入适量的EGF和bFGF。
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6 O! p. E% ~# H1 j* j    2. 保持足够的细胞密度，细胞密度过低也会使原代细胞生长缓慢。
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    3. 原代取材至培养的过程中，注意保持细胞的活性。（比如：保持低温，尽快培养，适度消化，等等）- b8 b8 ?" t9 t' C5 D. f! L: w0 l  Z9 R  @
3 B. d. f- q. s8 Y, L% w5 \( x
    以上仅是个人经验，你可以试试看，有问题可以再交流。
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    还有，我不是太明白你为什么要尝试加入10%血清？ 因为这样会使细胞贴壁，并诱导分化。" L# n7 k) }* S! P* H

* M- i8 h+ o# G4 O9 `2 t    也就失去了你最初的意义。/ [( I/ N3 N& k: l. _2 L- S
: K: R5 q! z9 A9 |* i2 w
    不知道你有什么想法？

fxy805

谢谢！！！
9 I# f, N' h1 D5 t. m, h" q当初选择使用血清是为了使细胞扩增，结果发现效果不佳。
& B  H' C! f! l& G7 l: j1 A现在还在摸索条件。
6 s( U/ N0 n: F8 S) ]$ f, R( y; h7 L3 d不知道你的QQ号是多少，还有问题请教啊！！！

深海寂寞鱼

不知道海洋版主是什么意见？6 W$ K7 M0 z) D  ~: b
如果海洋不反对的话，我可以把QQ号码给你。。
0 }/ y6 j; V/ _$ ]) l4 `$ W其实在这里交流可以让更多的人看到，大家集思广益可能对你更有帮助。

细胞海洋

回复 深海寂寞鱼 的帖子& h% |  h: Z9 j2 f, C; _" d) J
5 z. {) F0 b3 g
不建议公开自己qq号码
, K) J6 r" Y4 M' b# @- D( h" Y4 J' g
有问题在论坛讨论 更多人可以看到 也可以帮助更多的人
+ Q4 ^4 m  a- V$ R$ z6 V0 C9 ]! w; a3 t5 P0 X& p  U/ w
另外 公开自己的联系方式 很容易被不相关专业的人员骚扰

zjkenan

我最近在养乳腺癌的原代，长得好慢好慢啊，我是12月9号做的，现在还没长满呢，我是用的1640和胎牛血清，是不是因为我用的是1640呢，所以细胞长的慢

yezi_830823

如果是原代培养的细胞，是长的比较慢但是长起来以后就快了。如果细胞一直长的很慢建议你在培养基里加一些ITS，不要加血清。祝实验顺利

luoziwei

回复 zjkenan 的帖子8 Y& @1 Z0 e/ d5 s5 }6 p6 t# u* X/ G

( Y; I& d$ o0 Z) f1640培养基很好的呀，我们实验室就用这个来做癌细胞的

zjkenan

回复 luoziwei 的帖子0 j2 X, ^: C% c- k. j

5 Y& j& K7 x! S9 S, u0 Y! s哎7 A$ ?, H7 y3 M* R) B
我现在得了3T3恐惧症了  X# V' o3 j" U' d, H. K! M5 q
老板让挑克隆到3T3上
- q9 T/ W1 W6 n/ `; O" B后来那个细胞就长得飞快( U8 d! M- Z3 _. u5 J1 W
我总觉得那个不是癌细胞
  s3 u0 d4 ^( y% R. ^# P怎么看怎么像3T3% j. ]1 X& E% L2 Q0 G
可是我的3T3已经用丝裂霉素10ug/ml处理了3小时了& \9 e8 ]) x6 n9 Y0 X) ?, u
郁闷啊