间充质干细胞复苏问题

xuehu20

间充质干细胞150cm2的瓶中培养，融合度90%时冻存的，冻存液为DMSO:血清=1：9，复苏时在37度水浴锅中融化成半冰半水状态，倒入预冷的DMEM培养基中1500转离心10min，胎盘蓝染色细胞存活率75%，可是培养一天换液后发现细胞全漂着，咋办啊？救命啊

xuehu20

回复 luoziwei 的帖子4 Y& \" A3 b2 }. P% B. W- Y

7 K2 z: M2 M5 R. k4 q不是染色的细胞死了，是培养瓶中的全死了！惨啊

xuehu20

回复 mbjane 的帖子
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% ~4 W% n' c2 l+ I9 O; _能详细介绍下你的冻存复苏步骤及培养基、冻存液的配方吗

xuehu20

回复 askage 的帖子: f1 `% \2 {1 t1 V  G

8 |* [# r6 K; Y5 }8 y9 v- x你最终采取的方法是怎样的

xuehu20

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* _6 R- R3 Q  h$ T1 _; K0 t7 J& Q' g+ U9 _; F7 i1 _' N% a
请问你们的常规方法是老师的经验之谈还是有理论依据啊，要是有理论依据的话，请问融化细胞时为什么要全化成液体，转到离心管离心时为什么要稀释10倍，还有冻存前一天为什么要更换培养基啊