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楼主: hhchen418
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小小研究员

19楼
发表于 2011-12-9 18:31 |只看该作者
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回复 张俊克 的帖子
5 U$ g: s5 s0 _, u. ~: s5 v9 I
2 j9 t' F7 f/ h& f$ c7 K17.18楼二位的回答怎么都一样?

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金话筒 优秀会员

18楼
发表于 2011-12-9 16:57 |只看该作者
要用细胞刮进行物理作用,否则很难使细胞完全掉下来,对细胞没有什么伤害,细胞的存活率依然很高,直接用生理盐水吹是不能完全吹不下来的。

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17楼
发表于 2011-12-9 16:55 |只看该作者
要用细胞刮进行物理作用,否则很难使细胞完全掉下来,对细胞没有什么伤害,细胞的存活率依然很高,直接用生理盐水吹是不能完全吹不下来的。

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16楼
发表于 2011-11-26 22:56 |只看该作者

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15楼
发表于 2011-11-26 22:32 |只看该作者
一般轻轻吹打成熟DC就可以从瓶底下来。
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优秀版主 金话筒 美女研究员

14楼
发表于 2011-11-23 09:33 |只看该作者
物理的方法吧,吹打,如果吹打不下来可以用细胞刮刀!
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13楼
发表于 2011-11-13 15:12 |只看该作者
不同的细胞对胰酶的敏感程度是不一样的,dc可能比较久,20分钟+反复敲打瓶底
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12楼
发表于 2011-11-13 14:37 |只看该作者
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9 L* y: w; w1 y% B  ?& K) Z: z" T  \) n) G3 m. J( s6 X1 x
离心时间和强度够么?降速的时候一定要慢啊。淋巴细胞分离液也很重要,如果刚开始做没有把握可以用进口的先试试,之前用过一个什么cellgro的蛮好用的。
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11楼
发表于 2011-11-13 14:34 |只看该作者
回复 hhchen418 的帖子
) F) \5 ^6 J; Z5 Y1 J% E& t3 n( |$ S* e
现在有更温和的酶可以用吧,不用也能下来,低浓度胰酶好像也可以
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10楼
发表于 2011-11-11 14:33 |只看该作者
大致是以下步骤:
5 V# L2 n7 Z: T/ z$ o% d  C把培养液吸出
% p2 K5 Q  P' g→加入适量生理盐水(75cm²培养瓶10ml左右)
+ n; s9 w3 Y# A; W# Z→把培养瓶平放,来回摇晃几下
$ I5 I2 m; w- N' @, C! K) x/ a4 a→吸出盐水,重复以上步骤清洗2-3次( q. i7 t" O7 K- S1 l
→加入适量生理盐水: p; _2 R% V/ S1 C1 z5 X
→用移液管来回吹打细胞,使细胞脱落
+ }/ I/ E; V6 x7 k→平放培养瓶,用力拍打,再吹打→显微镜下观察
6 K  ]$ p0 M+ G1 ^/ w  s7 \6 C( t→拍打,吹打,观察! k9 T* Q4 |' `
→细胞全部脱落→…………
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