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DC 如何收获   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-11 17:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
请问大家一个问题:树突状细胞培养7天后要收获,该采取哪种方法?是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-1-12 00:08 |只看该作者
细胞刮刀刮
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藤椅
发表于 2011-1-13 11:27 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子
3 Y% \" G- p0 ]! i$ w0 w9 V4 e4 Q% @0 B
谢谢!

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板凳
发表于 2011-1-13 11:29 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子
8 L& H8 y0 `( S) k& k" `, ^0 U) Y5 P  L8 n! Y" M
用细胞刮刀刮的话,会不会损伤细胞?
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报纸
发表于 2011-11-10 08:52 |只看该作者
4度盐水冲洗
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地板
发表于 2011-11-10 10:42 |只看该作者
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7楼
发表于 2011-11-10 10:52 |只看该作者
这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定,看不到白膜层的几率一般是多大?这个与离心机,离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。
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8楼
发表于 2011-11-10 23:56 |只看该作者
回复 shangjianzhong 的帖子# X1 Q& Y. I" o6 @- ?
' T* a# i- i# G! y
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9楼
发表于 2011-11-11 10:18 |只看该作者
胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试
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10楼
发表于 2011-11-11 14:33 |只看该作者
大致是以下步骤:
# r& V7 S. R/ D* ]$ B  |把培养液吸出
6 H" {* G# o4 C6 I4 W; k→加入适量生理盐水(75cm²培养瓶10ml左右)9 @: Q: I& i. V8 _6 C* K
→把培养瓶平放,来回摇晃几下& k% d1 p* m( N$ L
→吸出盐水,重复以上步骤清洗2-3次
) s/ U- g7 h4 f2 N2 ]! i+ {( u7 q→加入适量生理盐水
1 X+ o7 c* c/ z→用移液管来回吹打细胞,使细胞脱落
0 B8 [4 ^: E, P' Y+ H/ L→平放培养瓶,用力拍打,再吹打→显微镜下观察% {. X3 O; S: @9 V4 m: w  v
→拍打,吹打,观察1 P: y* x2 E& ?3 u+ Z7 A+ G9 _
→细胞全部脱落→…………
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