DC 如何收获

hhchen418

请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集？

透明之蓝

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5 K8 r+ E3 }& J+ Q( ^# B& @回复 hhchen418 的帖子8 E7 A. {; e- F6 G, x; M0 e* T

0 `5 T3 l! U, X4 z0 {5 y8 T% n3 a1.不用消化
$ K" k( z0 |0 [! h/ {0 P2.细胞刮刀刮下来的，多数不是DC; ^$ {% k( x: K! ^2 n7 P
3.DC属于半贴壁，培养出来的也是成团的，直接吹打就可以

lyj-0017

首先可以肯定的是不能用胰酶消化，有文献称胰酶对DC细胞表面抗原有剪切作用，所以排除掉胰酶；用刮刀肯定也对细胞用损伤，如果要应用到临床的话，该方法个人认为不可取；通过温差的方法使细胞脱落也试过，效果也并不理想；至于有同学说仅仅用生理盐水冲洗，我个人持怀疑态度。后来使用一种比较温和的消化液（Solution C），消化效果也并不理想，加消化液于37度温箱15分钟后，移液器反复吹打细胞（6孔板内），最后仍有一小部分细胞下不来。DC细胞的收获并不是一个小问题，处理不好的话，虽然能收集部分细胞，但是真正应用的话可能效果并不会那么好，所以还是应该寻找更温和的方法来收获细胞，这个问题大家还是多讨论讨论，多想想办法吧。

我是丁香

求促DC成熟的方法。

jack063@163.com

回复 hhchen418 的帖子/ v9 [2 l" |3 R$ w+ }$ q/ r

6 O* v$ h: s0 q+ z, x7 K* m% u损伤肯定会有。在细胞吹打不下来的情况我才使用。楼下有个说得很具体了，他的方法还洗吹不下来就上刀吧，一定要清点哦

wagumaxida

hhchen418 发表于 2011-1-11 17:14 ( I+ \3 ?* l; _
请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤 ...

/ K, i7 s5 P4 t2 i) F8 L在第七天只要刺激成熟充分，很容易就吹下来了，甚至晃一晃瓶子就下来了，因为成熟DCs会成团脱离贴壁

朱砂泪

细胞刮刀刮的话的确会对细胞有一定损伤。

jxaf3900824

俺一直用的细胞刮

woosheng

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+ z- m4 h$ m9 U: J& m4 `! j8 `; m5 g; F; m; x2 w6 \
认同

细胞海洋

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% m8 F" l9 {5 }+ N17.18楼二位的回答怎么都一样？