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DC 如何收获   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-11 17:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
请问大家一个问题:树突状细胞培养7天后要收获,该采取哪种方法?是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-1-12 00:08 |只看该作者
细胞刮刀刮
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藤椅
发表于 2011-1-13 11:27 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子
3 R5 B3 H- Y0 G) s, |9 H- g& Z" T) O
谢谢!

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板凳
发表于 2011-1-13 11:29 |只看该作者
回复 tangyvhuang 的帖子7 ~6 K, m7 Y% i
+ l( i5 Q( q+ V1 U4 q$ ~
用细胞刮刀刮的话,会不会损伤细胞?
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报纸
发表于 2011-11-10 08:52 |只看该作者
4度盐水冲洗
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地板
发表于 2011-11-10 10:42 |只看该作者
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7楼
发表于 2011-11-10 10:52 |只看该作者
这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定,看不到白膜层的几率一般是多大?这个与离心机,离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。
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8楼
发表于 2011-11-10 23:56 |只看该作者
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9楼
发表于 2011-11-11 10:18 |只看该作者
胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试
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10楼
发表于 2011-11-11 14:33 |只看该作者
大致是以下步骤:
& [3 J) b( N' {0 x4 v把培养液吸出
3 N! T& K+ C% X  R6 A. \! }→加入适量生理盐水(75cm²培养瓶10ml左右)
4 L( n/ U# A% K% e7 O- I) d→把培养瓶平放,来回摇晃几下
/ h- h  j; t4 ?→吸出盐水,重复以上步骤清洗2-3次
* g# f7 e) u; q3 `& ]→加入适量生理盐水  r5 V1 |6 r( j9 c7 ]
→用移液管来回吹打细胞,使细胞脱落/ `& @' V. O" D3 p
→平放培养瓶,用力拍打,再吹打→显微镜下观察0 m( B5 c' p6 |7 \+ I! }
→拍打,吹打,观察- q3 \8 U) O3 _: m( s
→细胞全部脱落→…………
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