DC 如何收获

hhchen418

请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集？

tangyvhuang

细胞刮刀刮

hhchen418

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1 u' [! B. x- B% y5 y9 `2 m* ?# G' F1 D% z. w- c; F0 T- W
谢谢！

hhchen418

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  h, P- m0 a' j2 H& t. B: f- t! M7 J3 W8 ]5 Q) U
用细胞刮刀刮的话，会不会损伤细胞？

大少爷

4度盐水冲洗

花饶然

这个主要看你们采用实验室采用的分离工艺是否已经稳定，看不到白膜层的几率一般是多大？这个与离心机，离心参数还有血液的个体差异都有一定关系。

细胞海洋

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yangwy028

胰酶确实作用不起来。物理的方法确实可以试试

yxwfly

大致是以下步骤：! ~8 T* W% N% s8 a. g" @
把培养液吸出7 u1 T" J3 h0 }% ?
→加入适量生理盐水（75cm²培养瓶10ml左右）
' v  _8 H) ]0 h5 T→把培养瓶平放，来回摇晃几下$ }0 v  M, q$ P" B0 B) V3 J4 w% W
→吸出盐水，重复以上步骤清洗2-3次2 ?: a, Z# G# q9 S% A. J. ?4 l- e
→加入适量生理盐水7 o' @3 x" D+ f6 [& ~) U5 R0 z
→用移液管来回吹打细胞，使细胞脱落' W& f; V: _7 T! ?0 d! ?9 F% R
→平放培养瓶，用力拍打，再吹打→显微镜下观察
# M4 C, Q2 `1 T→拍打，吹打，观察
, O7 C( d. t, J0 X3 _: Q- m→细胞全部脱落→…………