DC 如何收获

hhchen418

请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤后收集？

透明之蓝

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1.不用消化# U9 S/ M$ w* A" q5 _' h4 u& |
2.细胞刮刀刮下来的，多数不是DC3 f; a& y. ?# v' E9 j
3.DC属于半贴壁，培养出来的也是成团的，直接吹打就可以

lyj-0017

首先可以肯定的是不能用胰酶消化，有文献称胰酶对DC细胞表面抗原有剪切作用，所以排除掉胰酶；用刮刀肯定也对细胞用损伤，如果要应用到临床的话，该方法个人认为不可取；通过温差的方法使细胞脱落也试过，效果也并不理想；至于有同学说仅仅用生理盐水冲洗，我个人持怀疑态度。后来使用一种比较温和的消化液（Solution C），消化效果也并不理想，加消化液于37度温箱15分钟后，移液器反复吹打细胞（6孔板内），最后仍有一小部分细胞下不来。DC细胞的收获并不是一个小问题，处理不好的话，虽然能收集部分细胞，但是真正应用的话可能效果并不会那么好，所以还是应该寻找更温和的方法来收获细胞，这个问题大家还是多讨论讨论，多想想办法吧。

我是丁香

求促DC成熟的方法。

jack063@163.com

回复 hhchen418 的帖子3 @# p8 F- V  T. v/ ]6 a

1 b4 M9 B, ?6 }% F损伤肯定会有。在细胞吹打不下来的情况我才使用。楼下有个说得很具体了，他的方法还洗吹不下来就上刀吧，一定要清点哦

wagumaxida

hhchen418 发表于 2011-1-11 17:14 6 I+ _. q$ C! H$ n) ]: ?* O
请问大家一个问题：树突状细胞培养7天后要收获，该采取哪种方法？是直接用PBS冲洗下来还是用胰酶消化后洗涤 ...

3 W: u& Q8 A: z: {3 z4 p在第七天只要刺激成熟充分，很容易就吹下来了，甚至晃一晃瓶子就下来了，因为成熟DCs会成团脱离贴壁

朱砂泪

细胞刮刀刮的话的确会对细胞有一定损伤。

jxaf3900824

俺一直用的细胞刮

woosheng

回复 txy_love 的帖子, M$ v$ c) `: j9 Z# h2 X5 G8 r. H
  j6 [! g; U; c( F( e
认同

细胞海洋

回复 漂泊的风 的帖子
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* N! U5 @  m4 F6 j( ~: D& c! P17.18楼二位的回答怎么都一样？