SP分选的细节问题

avril77777

请教做过SP分选的同仁，添加PI后需要染色多长时间再上机检测？谢谢~~~

小婉在此

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2 R1 y0 x, G8 A9 b( U0 Y' R$ k1 U
我做的分选一直得不到标准的图啊

xubq2011

我们是上机前五分钟加PI

ying

PI在Hochest染好之后，上机之前现加都可以吧似乎～不过我没试过，我们平台老师说的～

Girlmet_FISH

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; B# z# h. l" Q) C( t
7 |; |+ ^; n( S# \- f3 f广州。。。貌似不是一般的远。。

shandazlj

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7 @0 ^! Z; b& N3 |; F/ P  v/ t: W5 [2 {+ w3 l- U3 Y
请问你们实验室在哪儿？对外做分选吗？我是山东济南的。想做sp分选。但是这儿没有可供分选的流式细胞仪。想打听一下，哪儿的实验室对外做sp分选？

Girlmet_FISH

回复 avril77777 的帖子* N+ o" ?7 a3 Y* N2 q. M

8 S5 X6 D* G% [0 b. ?# N罗丹明不是DNA染料吧？有报道罗丹明B以沟槽方式与单双链DNA相作用，但随DNA的浓度增加，发射能量减弱，如果做SP不合适吧？不就都成了弱染了。。。我们这没用过，你能否把这方面报道的文献发一份给我：rd6-sysucc@qq.com
# g. z" ?( o( \多谢！

avril77777

回复 Girlmet_FISH 的帖子3 a& S9 D4 H$ H' F1 Y( b

( T4 F0 F6 _- `8 w# m6 R* q我看到有文献用罗丹明代替HO33342染料的，请问，你们那有这么做的吗？结果怎么样？

Girlmet_FISH

回复 avril77777 的帖子# u# R) V% j+ n0 y
' [6 n, y8 r9 n* t7 f1 A
我们这做得很多，现在干细胞也是热门，经典的“拖尾”就是弱染侧群嘛，有很多图都是很漂亮的，这一般跟染色有关系，不同的细胞染色的Hoechst33342的浓度不一样，一般得摸一个实验条件，做个浓度梯度！再就是跟染色过程中的是否染色均匀也有很多的关系。我们用的是目前全球据说是最顶级的分选流式细胞仪，型号是MoFlO XDP

avril77777

回复 shewawa 的帖子
* P! V2 c& ~  g( ]2 k; `2 q5 q& P! e5 P4 _5 V* [+ X  w
恩，就是side population。请问，你看到做出来过经典的“拖尾”图了吗？
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