关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。
0 W9 h. ]/ x) Q# A; }. q2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。
5 |7 Z- v' Y1 @9 ]- G3.染色前需加60%异丙醇5min。
( R' C$ {& m6 f) O4.染色时间15~20min。3 x0 r& x: r, a1 d0 j
5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。+ p0 o; A6 K. b/ k, e7 ~
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。2 r2 i" K! J7 ]4 g
步骤6 s+ v5 \8 X' f& M( `2 P# l/ a6 w
1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上& O8 ^# {0 n8 {+ p: ~& h
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次
& m. Q, l+ ~2 a1 o3、染色：加油红O染液染色10-60min+ d$ B+ m8 G1 h+ i3 G
4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着. S# e  A0 Q4 O* M. D9 c( \9 l
5、拍照记录  k0 N) I* C# T' D! i/ ~/ P4 c
0 Z2 B2 L" F$ k
注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢( L8 |% Q/ i1 I; `8 D! s- i

; b+ i3 O+ M0 ~$ b. _- b附图：& O4 Q; F, Q/ @% z3 p

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子! a# n: p: ^. k- l, }( C
6 a$ }3 B9 R# y" `. o
好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子
9 R  T6 F% |9 C% }# U7 e# R% u7 ~$ Q7 @, J  Q! e) G: a; |0 @* R
如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子- z0 Q4 k8 Z& v8 T' e% a
2 g. O7 w8 G  h0 O8 O4 ~
一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  ) n$ R8 C, b  n$ H) _4 B% F
稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因