请教关于转染后筛选阳性克隆的问题

jefferson

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间充质细胞是比较难转染的.一般电转和核转用的比较多,或者用病毒,楼主有条件的话最好做电转或核转.( o( p) I/ m4 I: n* {
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如果做普通转染,建议楼主先比较下几种转染试剂的效率,Lipo2000, Fugene6, Fugene HD等,不同的试剂对不同细胞类型的转染效率是不同的. 比如对293T细胞, Lipo2000比Fugene6要好, 而对Plat-E细胞,虽然也来源于293细胞,但Fugene6就比Lipo2000好了.6 C5 c$ y0 k+ z% a. j4 J* P' u6 B) F. \
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此外,Invitrogen公司去年新开发了一种试剂, Lipofectamine LTX, 比Lipo2000效率更高的同时,细胞毒性更低, 可以允许相同细胞数目下加大DNA量和转染试剂的量, 这样也能达到提高转染效率的目的. 当然了,价格也近乎是Lipo2000 的一倍.