ips细胞几天换液好，培养30代需要多长时间，谢谢！

manybit

ips细胞几天换液好，培养30代需要多长时间，谢谢！

jefferson

绝大多数都是每天换液, 跟ES培养条件相同. 也有几篇文献报道两天换液一次, 但是这种情况下, 每次换液时加的培基比较多. 比如100mm Dish 加12-15ml.
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, G! T  o& D+ R, V( N( l一般iPS 平均6天传代一次.  所以培养30代大概需要半年.

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小鼠得ips 两三天就可以传一代  一般可以两天换一次 但是如果克隆比较多得话 建议每天换液

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小鼠得ips 两三天就可以传一代  一般可以两天换一次 但是如果克隆比较多得话 建议每天换液

lorey

这要看细胞状态和培养基的颜色来定。一般开始两天换一次，后来一天一换。如果培养基变黄了，必须要换了。

573639471

jefferson 发表于 2011-3-7 10:06
6 ]! I: ?+ G. d( h8 r0 l5 S绝大多数都是每天换液, 跟ES培养条件相同. 也有几篇文献报道两天换液一次, 但是这种情况下, 每次换液时加的 ...

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请教一下，传代初始细胞浓度多大为好？比如我有一支1000万细胞的冻存液，复苏后传代到几个T75或T25中，细胞密度会比较合适呢？

jefferson

回复 573639471 的帖子
' x6 ~2 b. {8 P  w
1 S+ q1 x" ~9 L3 ^/ M1 a( }' \不同的细胞传代时这个密度是不同的, 有的细胞如果比较稀, 没有细胞间的接触, 很难长起来,细胞会逐渐老化, 比如羊水细胞, 稀的话对其生长不利; 有的细胞则在低密度下生长的比较好, 比如有报道MSC用低密度接种时生长会较好. 所以, 这个问题取决于你的细胞类型.
9 P$ Y+ P# m2 P+ Q4 b: }1 c, W  I4 X& f& o' X7 w. e' c0 d, p; J
同时, 如果是复苏细胞, 还涉及复苏活率的问题, 复苏的活率很难控制和计算, 取决于你的细胞类型, 冻存时间, 冻存条件, 复苏操作条件等等. 所以很难准确的说瓶子里种多少个细胞比较合适. 一般都是根据之前培养的经验来定. 如果之前没养过这种细胞, 最好查些文献参考.

573639471

回复 jefferson 的帖子) X0 f3 o3 O  q! N) R6 ^

7 Q  A/ ?2 B: u# y" {9 \- S非常感谢。我养得是人的ips细胞

懵懂干细胞

iPS细胞的培养跟ES的差不多吧，换液跟传代最主要考虑的因素是细胞密度和培养液的消耗程度吧！/ x$ S: i3 y. O: B2 ?, T4 R
我样ES细胞的时候用的半换液！

前途似锦

看你是1比几传代，如果细胞很密，集落就很小，这样你传代的时间就会很短，但是如果营养跟不上，就会出现分化。