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[请教] 紧急求助:染色体G显带 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-3-15 19:26 |显示全部帖子
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这两种核型都是不能做带型分析的, 都没显出带啊) g) T6 e3 W# `7 r% P
  ~) y+ Q* y4 ]0 j' H% r) U' j
两幅照片中的核型都不分散, 应该是低渗的时间短了, 或者滴片时高度偏低, 所以染色体分散不开, 这种核型只能作为看染色体数目是否有异常之用. + J8 S5 B; N* K, |6 L1 N

1 Q+ M7 h* T! Y5 e4 s另外两个核型中的染色体都偏短, 下面一幅的稍好点, 但是还是短了, 应该是秋水仙素的处理时间过长导致的.7 q% ~) X3 L4 E4 c

; q' y  ~3 E6 C! V; O& y胰酶消化时间过短就不会显出带型来, 没用胰酶处理的和处理过的都没带型, 说明消化时间不够. 另外上面照片中的染色体染色较深, 说明染色时间长了, 应同时多做几张片子摸索消化和染色时间. 消化不充分没带型, 消化过了的话, 染色体会发毛, 但还是会有带型出来.
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沙发
发表于 2011-3-21 15:56 |显示全部帖子
lorey 发表于 2011-3-16 10:06 7 H. u$ D4 M$ \
回复 jefferson 的帖子
; V$ U: H6 @+ [1 b$ z/ Z* C* M
9 n2 i+ k9 D$ N: i两幅图是同一个细胞,滴了两张片子而已,低渗什么的都是一样的,秋水仙素是1h。

( x0 R4 H. W( j" p2 o9 l# \不知道你的是什么细胞, 不同细胞在处理细节上稍有不同.) A" m( B* x/ `# D

; W9 o/ R* h* N秋水仙素不知道你用的是什么浓度的, 其存储浓度一般是20ug/ul, 对人血细胞来说, 工作浓度大概0.1-0.15ug/ul (估算). 处理2.5h 后收获. 细胞类型不同, 需要调整秋水仙素的工作浓度, 以具有较多分裂相同时染色体伸展较开为原则.
2 L) A! u, k$ T: X/ ^2 s  \' ~" S% M
你的结果低渗的肯定是不够的, 染色体大部分还聚集在一起未分开. 所以需要注意下.
: W4 g8 _" W4 B- f) h# B8 N, b2 L! \8 f
关于消化, 还上面我的回帖里一样, 消化时间不够没条带, 消化过了也会有条带,只是染色体会有点发毛的感觉.
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