讨论：Hela细胞不同条件下的成球状况

amosummer

最近想用Hela细胞做成球实验。所以首先将贴壁培养在DMEM中，等长满后换加细胞因子的完全培养基，开始会有很多细胞漂浮起来，以为会和MCF7细胞一样长成球的。但培养10天左右，并未成球（2-3天换液一次）。细胞还是以单细胞为主，也有些漂浮起来的（第一张图）。后面我用CD133将Hela细胞分选，分选后的细胞直接用完全培养基培养，却发现都能形成细胞球，甚为奇怪（第二、三张图）。有谁能给我解释一下原因吗？
# m" W* I* T( p

不倒翁

貌似是没消化好啊  如果没消化好的话就会长成这样 种下去就不均匀

sfk06

回复 不倒翁 的帖子
/ P: h1 n+ t2 X$ m+ P6 j. Z5 G2 {, i" _  W- J
应该是消化不好造成的吧，我以前消化不好就出现过类似的现象

open1230

楼主想表达CD133是Hela细胞肿瘤干细胞标记物这一观点是吗？; x0 o. S! L, }! C8 ?

amosummer

回复 open1230 的帖子, G& v, B' s3 t) y) p9 S- t5 {# i
3 G& E9 T' r- `4 _9 T9 {2 v6 g) j, z
有这样的尝试！也正在做老鼠实验呢。

amosummer

回复 不倒翁 的帖子7 L0 d- U9 g+ O- G( R" H$ A0 F
8 N# ?& z9 A: {# }; v7 I0 v
这些细胞没有进行消化，直接培养的。我的意思是为什么从DMEM培养基到完全培养基不能形成细胞球，而分选后反而能形成呢？

amosummer

是不是在培养基中有血清的存在会影响成球呢？

shen_coco

我觉得通过CD133分选，可能使干细胞的比例提高，没分选之前太多的非干细胞，对干细胞成球会产生反作用

amosummer

回复 shen_coco 的帖子
1 K8 ]" E2 n/ F2 |3 V( ]5 ?; @! G
你是如何确定CD133分选的细胞就是干细胞呢？有经过下一步的验证吗？比如体外的成球实验，和体内的小鼠移植呢？

shen_coco

回复 amosummer 的帖子, e; Y  K: m9 c5 P% J
) z  Y4 F( e2 N9 n# B1 l
金标准就是小鼠成瘤了，这个肯定要做的