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讨论:Hela细胞不同条件下的成球状况   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-3-19 16:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近想用Hela细胞做成球实验。所以首先将贴壁培养在DMEM中,等长满后换加细胞因子的完全培养基,开始会有很多细胞漂浮起来,以为会和MCF7细胞一样长成球的。但培养10天左右,并未成球(2-3天换液一次)。细胞还是以单细胞为主,也有些漂浮起来的(第一张图)。后面我用CD133将Hela细胞分选,分选后的细胞直接用完全培养基培养,却发现都能形成细胞球,甚为奇怪(第二、三张图)。有谁能给我解释一下原因吗?
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沙发
发表于 2011-3-19 19:33 |只看该作者
貌似是没消化好啊  如果没消化好的话就会长成这样 种下去就不均匀
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藤椅
发表于 2011-3-19 21:42 |只看该作者
回复 不倒翁 的帖子
: v- Z" f9 l% G. [: C4 I& P* |! r5 R; d
应该是消化不好造成的吧,我以前消化不好就出现过类似的现象
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板凳
发表于 2011-3-19 22:32 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
楼主想表达CD133是Hela细胞肿瘤干细胞标记物这一观点是吗?1 j3 S9 `) W! B
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报纸
发表于 2011-3-19 22:59 |只看该作者
回复 open1230 的帖子$ E9 ?) v% V6 j2 s7 a+ G0 [
6 w* A2 Q/ M  h+ g, e! X$ L
有这样的尝试!也正在做老鼠实验呢。

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地板
发表于 2011-3-20 09:22 |只看该作者
回复 不倒翁 的帖子2 T, ~: n9 p4 k) L1 Y
9 @7 F* {5 [" `1 R4 I2 M8 x4 c
这些细胞没有进行消化,直接培养的。我的意思是为什么从DMEM培养基到完全培养基不能形成细胞球,而分选后反而能形成呢?
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发表于 2011-3-21 08:46 |只看该作者
是不是在培养基中有血清的存在会影响成球呢?
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发表于 2011-3-28 22:03 |只看该作者
我觉得通过CD133分选,可能使干细胞的比例提高,没分选之前太多的非干细胞,对干细胞成球会产生反作用
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发表于 2011-3-28 22:10 |只看该作者
回复 shen_coco 的帖子
. _3 h  x8 G8 t. Q3 r1 x! `1 x4 x0 K- B7 L+ |, X; L
你是如何确定CD133分选的细胞就是干细胞呢?有经过下一步的验证吗?比如体外的成球实验,和体内的小鼠移植呢?
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发表于 2011-3-28 23:13 |只看该作者
回复 amosummer 的帖子
- _0 b+ [: \6 Z% v4 N+ Z/ M$ M
/ f7 y) d& e; \' H/ k金标准就是小鼠成瘤了,这个肯定要做的
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