DAPI和hoechst染色的区别

hndxws

最近想做个免疫荧光，在染核问题上有些疑问。DAPI染核和hoechst染核有什么区别，为什么有的人用DAPI，有的人用hoechst。个人觉得荧光的强弱和稳定性的要求不同可能导致选择不同的染色方法，不知这算不算是区别？还有没有其他的区别？

LiZhangRong

DAPI标记细胞的很大不足就是当标记细胞死亡后，就可以释放出DAPI，将周围未标记的细胞标记，从而产生假阳性。

hndxws

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1 U- w) D3 w& n* ]' n1 F0 r, M8 U( P& S' r$ Y
嗯，谢了

meister

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. p! p- o, u9 v4 v0 I1 J9 p- N
0 K3 q5 k7 Z2 H* w我们做共聚焦用的hoechst

hndxws

回复 hualin840518 的帖子% N9 M; g' m8 W# d# v  b
5 y& o+ P( j' J' i9 h
嗯，明白了，thank you

hualin840518

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4 A8 @2 H7 o- p+ Y/ M& v
/ _6 n6 E9 g' b; o9 @- R' QHoechest 是膜透性的,因此在活细胞时候能轻松进入;DAPI是半透性的,有选择性的进入.0 h; s0 J3 ^: Z8 C# x
因此Hoechest  一般用来染活细胞,可以长驱直入;DAPI一般是染固定细胞.
  u8 m# V7 m6 A9 V2 Z, W0 O共聚焦都可以的，DAPI用得多一些而已！

hndxws

回复 hualin840518 的帖子' ?% D& e; E' U0 w# V

% A" f$ ~& I* ]请问你觉得做confocal时可以用hoechst做吗？为什么我看到用DAPI的比较多，这是什么原因?

hndxws

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* n& B2 U$ z6 p! Z0 L1 F& Y- `- k
+ B3 X2 [2 L8 n0 Y$ m# i那做共聚焦用hoechst好不好呢？还是DAPI比较好用啊？

hndxws

回复 starlancer 的帖子  ~( T: V* h# P( D" N( f
, V! N; G( Z# s6 i! S
细胞都死了，无所谓毒不毒吧

王乾

Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低， Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
2 H+ o0 K' y: s  c DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。0 D" L3 t& J1 Y+ T- M