生精小管体细胞的原代培养

wxiouno4

本人系新手,不知道小鼠生精小管体细胞如何分离,目前文献只有支持细胞的分离方法

starlancer

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你是要建系吗？你们实验室的具体硬件条件如何，有没有流式细胞仪？如果没有的话可以考虑用磁珠分选，不过无论用哪种分选方式你都要找到合适的sorting marker。' q" }* s6 c) |  j$ }9 O
对于组织细胞的分离原理大致都是：先进行粗分选，得到目标细胞和一些side product，然后通过facs或者macs法进行purification。

wxiouno4

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谢谢.流式细胞仪有的...本人是新手很多地方不清楚...目前想做一个支持细胞和生精细胞的混合培养,想知道具体的培养方法,是否采用重力沉降分离,培养之后想知道形态学鉴定有多少意义,以及标记物检测方面的

starlancer

回复 wxiouno4 的帖子$ L6 `' m& [) M9 s, e5 V( g6 K( ]1 P
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如果做混合培养的话，用两步法酶消化后基本上就是sertoli细胞和精原干细胞的混合物了。形态学的鉴定只是初步的判断，没有大的说服力，需要从多个指标进行检测，比如说标志基因的表达，端粒酶活性，细胞核型等等，最关键的是自我更新能力和分化能力的证明。建议你多看看相关文献。