sd大鼠来源的ADSC图片，大家帮助看看！

winqi

本人刚接触ADSC，前段时间提的sd大鼠的，共提了三批，% A+ a& y! d) g  r8 p4 p, \
刚开始都是这样，觉得长得还不错，密度可能大了点！
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1 F/ K8 z1 k8 h! i5 o+ u4 w可是等一传代，细胞就变样子了。几批细胞都是这样，细胞铺的太开了！" E% ^9 G# v8 j  J& g" b
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培养液就是10%fbs+L-DMEM加双抗。3 b% `3 h0 l1 h8 S" a7 H# ?
所以请大家给我看看！

clairezy1983

回复 winqi 的帖子+ c- R) [4 J/ i+ S' i6 U
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可能是消化过度导致的哦，传代的时候密度大一点。
9 l( y$ N5 q# O: _$ p大鼠的MSC我没有做过，我做过小鼠和人的MSC，我一开始做的时候总是存在消化过度的现象，小鼠骨髓来源的MSC消化时间要长一点，人的脂肪和骨髓来源的MSC消化都很快。慢慢掌握就好了，不要着急，多摸索多总结。0 n1 t  W! B+ V; W0 V
你可以少加点胰酶。

luwei8157

传代密度大一点，这样铺开的细胞还算可以，大部分实验可以用的
! Q% T3 z$ `' V* M+ W9 }/ K$ ^如果做再生，尽量状态好点

winqi

回复 clairezy1983 的帖子
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因为贴的太厉害了，很难消化下来！9 P: G! j  @+ m$ r6 |/ X
我先去培养液，pbs冲洗两次，加1ml胰酶，要消化5分钟才能消化下来！传代的时候就怕密度小，都是一传一的。/ y- `: L1 w, p- }
有什么需要注意的地方吗？

winqi

回复 luwei8157 的帖子. {5 N, t" k3 ~$ e
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我现在做的是向成骨方向诱导，细胞能用吗？
; z, M( k& U( f# ^; E& IADSC在冻存上有什么特殊的要求吗？

clairezy1983

回复 winqi 的帖子/ L+ ?$ |# J2 O1 b; x
+ W+ R+ A/ E  K3 B; _0 p
我一开始也总是犯这样的错误呢，越传越不好。消化不下来的都不是干细胞了哦，干细胞是相对容易消化的。消化不下来的就不要了。我们实验室有一个经常做小鼠MSC的牛人这么说的。

luwei8157

回复 winqi 的帖子- y; M0 ^* G* }9 p( x/ P* {( A

3 g- d3 x5 m1 r. C可以用 冻存和其他细胞一样 用血清和DMSO就可以

impingfan

我做小鼠的MSC也是类似情况，原代贴壁细胞状态很好，消化后就铺开很大，并且越往下传代细胞状态越不好！每次传代都会有一部分细胞消化不下来，继续加培养基也能长，不知道是不是MSC