我的小鼠MSCs

gact

D9的小鼠MSCs
* d, f, L' K) [6 o  U
4 Q0 _# b4 m- z3 T现在还是这么稀稀拉拉，，不均匀，，皿的中央比较密集，融合了，，，周围稀稀落落，，要不要消化传代了？
+ _! q$ f1 \+ B( _; C7 |6 _
/ c0 w, A% r2 ?/ P& c已经两天没有换液了。。怎么办？
3 K, D( T! f5 n6 R; ^& P
8 B5 S, n$ O" a9 X( Y" P没有加EGF，是两只老鼠股骨骨髓合在一起 的，，用的是60mm的皿。# A+ i& Y' \5 y7 j
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贴壁法。。

若兰汀

我感觉你的细胞活性不是很好，首先你要确定你分离的是间充质细胞，至少它是优势细胞群；然后就是你的细胞密度这么小，很难长起来，如果48小时后还没有长密的迹象就很容易老化了。小鼠的MSC比起人的或是大鼠的显得很脆弱，培养基中需要额外添加L-谷氨酰胺，对于FGF及EGF我个人不建议你添加，这两个组分常用于神经细胞诱导时使用，我那他们来诱导Nestin的表达，很难说他会不会诱导间充质分化。

gact

D11的照片。; C" Q/ }9 Q+ ^
1. 在某个角落，细胞实在太密了，，怎么办，其中大细胞==是什么。血液细胞？
" g* J) W- G  F7 j1 O  l2，怎么越来越多的直线产生了，，这是什么现象？

gact

gact

beginner

这个密度还可以再长一下，另外MSC挺容易聚堆的。越密长的越快。

nihaohao

可以传代，也可以再养几天
# S2 w, X1 L8 ?" c( N
- I; ]1 `3 D/ C/ ^# u; `细胞状态还可以，7 u7 G# K/ ~) O4 d$ z9 L0 ~# t
若要传代，如果密集的地方比较少，可以一传一。若密集的地方较多，可以一传二。如果细胞太少，细胞不容易长起来，容易分化。

xwzy

如果周围很稀，但中间已经融合，不传代中间的细胞不会分化吗？

xiaozhu86

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9 J& V' B. c) s: h: p, N. k
1 p2 \0 V! S7 ?& a( I我们这边的养的C57一直没有加过b-fgf，原代也都是72小时第一次换液，一直半定量，基本是两天一换，鼠龄一般是四到六周左右的~

gact

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0 l/ C( G: ~) [3 k
/ f3 E: p( q; J. f- S8 O前3天，圈全量换液，去除悬浮细胞；, k& }6 q, r5 j2 S
后来都是半量换液的；- Y) J7 [, L1 _0 u5 d& Z
第8天时，连续两天没有换液；; B4 R$ X) S  H
打算今天第10天半量换液；
" d* p8 u: X$ G* W不加b-FGF，没关系吧；; j0 n( Z$ D+ @6 P& L: U
大家用的是sigma 人的 b-FGF么？# K6 D% ]& E' s2 B7 D9 L