我的小鼠MSCs

gact

D9的小鼠MSCs
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# H. A: S; D1 U4 n. p现在还是这么稀稀拉拉，，不均匀，，皿的中央比较密集，融合了，，，周围稀稀落落，，要不要消化传代了？
9 G8 S3 X7 i6 y/ Y
0 y8 G$ y  y: ?9 m3 Y已经两天没有换液了。。怎么办？9 E. A$ E( T1 u& ~. m6 \

& A8 q) _: S% R2 {9 s3 G  H没有加EGF，是两只老鼠股骨骨髓合在一起 的，，用的是60mm的皿。
3 S- L  k3 {. h' S. q! Y7 O% d
7 E& k" q$ a0 D贴壁法。。

gact

gact

细胞，，中间有大大的“细胞”，，，是什么啊？？？

gact

今天不换液，，就会死了吧？？？

iceyang

大大的看上去不像细胞，可能是杂质，也有可能是细胞团块。中间的太密的话就应该传了，下次做原代的时候应该种在培养皿上之后轻轻的晃一晃，这样细胞可以在皿上分布的均匀点，建议你一传二。另外小鼠的BMSC的确不好养的。

biotly

还要再长一下，可以先换一半的培养基，不要全换，过两天再传。

aoppolle

建议胰酶消化一下，培养液重新悬一下，让细胞均匀铺在培养皿

biotly

是不是等下一代传代的时候注意一下啊，这一代就算了，刚开始原代的细胞还是少消化的为好！图上的细胞也并没有长得太密，MSC消耗营养也不多，换半液长两天没问题！

xiaozhu86

应该是还不能传代，密度不够，小鼠的BMSC密度依赖性较高，半定量换液两到三天换一次问题都不大~原代状态不好，传代之后有长好的可能性，但多数感觉还是不好，所以就再养养看吧~

gact

回复 xiaozhu86 的帖子. j5 A7 e# Y% G# N) Y
* I$ v3 a" K  k2 k. Z) s5 f
前3天，圈全量换液，去除悬浮细胞；
. n+ k0 |% d, g% l) p后来都是半量换液的；
. ~4 W* ]( z7 q* L第8天时，连续两天没有换液；
$ _. u. {( @& q, c1 S# i打算今天第10天半量换液；# S) p7 L  G  @$ U' K; I
不加b-FGF，没关系吧；
( j; _0 F. _/ k3 A( B7 p6 \大家用的是sigma 人的 b-FGF么？
. n2 W. H  M' l  f9 C& r1 A