请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

xiangchou812

细胞转染后用药物筛选一下，可以长出来克隆，不知大家怎么挑取的？
8 u& c; D- I8 a) R2 V我用过滤纸法，可能是不得法，细胞不往滤纸上粘，还在皿里。; F' O: c; \1 q3 I8 D
欢迎大家讨论，分享自己的经验。

xiangchou812

回复 SCNT 的帖子0 t( M; D& N/ k

8 h6 [3 E4 s, W! F4 X这样用的板子会不会太多了？

xiangchou812

回复 SCNT 的帖子# R9 `' A& G9 B. b
/ z" N. E1 m9 o/ m6 J6 E; q. g
应该比较纯，好的谢谢你的建议。. t9 k# ~8 D+ P/ ~7 s" d. w
另外，你们转化后接种时一般密度多少？

xiangchou812

回复 军医 的帖子
: N. y/ b" n% ~3 h' Q  t* X
& s4 s# I& F8 D! @( g5 k克隆扩增不起来是很正常的，毕竟体细胞在体外的扩增代数有限，所以说，筛克隆不难，但是想要筛到好的克隆就不那么容易了。

xiangchou812

回复 生物化学zy 的帖子( b& G9 t' Q( p; ]. u* ]+ H0 F7 k
0 a$ m* Z4 k: U+ S
谢谢。很好的方法

xiangchou812

回复 生物化学zy 的帖子% b+ J" w) P: D( V# x# U

* Q& G) {% C. ^' Q3 r玻璃的哪部分？不会是把瓶体砸下来，只留瓶口？用的时候倒过来？这能取到那么好的么？不知你们用的是什么口服液瓶子。6 {# |* r! i* s- Q) ^( Y* W% [9 S/ {

# K+ ?. ^; D4 `3 L* U% ]6 i- G欢迎大家继续讨论

xiangchou812

回复 wnavy200299 的帖子& y) F0 F& `$ o( B+ J5 i/ k5 N

0 E% z: B6 P5 g' K7 B+ r# c非常感谢。这下一目了然。图片还是比文字明了啊。
" W$ ~9 ^& y. q8 z# m5 E8 y不过这种方法好像只有在克隆少的时候管用吧？不过确实是个非常好的方法。
8 v0 ^, }! J' T9 I( y学习了。

xiangchou812

回复 绿雪 的帖子
/ w" c. V6 @# s" |3 x' e
, m* {0 Q% @9 A$ |/ I, N( q准确点说应该是打靶的难筛，随机整合的细胞还是相对容易很多的。$ A- ^6 D9 ~, f. a6 X
就用96孔板，一次转上两三皿细胞，做上两次应该就能筛得到的。