请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

xiangchou812

细胞转染后用药物筛选一下，可以长出来克隆，不知大家怎么挑取的？
- e0 O: D; e+ R: @* H我用过滤纸法，可能是不得法，细胞不往滤纸上粘，还在皿里。& g) K8 ], Q3 A0 I3 Y( b
欢迎大家讨论，分享自己的经验。

xiangchou812

回复 SCNT 的帖子& Z3 \7 w% O: u5 v+ @) L# ]

: E' T; [. F8 E- v  A% i这样用的板子会不会太多了？

xiangchou812

回复 SCNT 的帖子
: L5 B- f, Y; K- N( ?! h' C, v  e% ]8 F* O/ p
应该比较纯，好的谢谢你的建议。
( G3 X) ^2 E% y2 g$ ~0 }, D  ?) z2 r5 B3 X另外，你们转化后接种时一般密度多少？

xiangchou812

回复 军医 的帖子+ O: o1 \' q  M7 ~( J/ }; l( [6 \

( j# u* W6 O# b, P3 J, w$ B* @克隆扩增不起来是很正常的，毕竟体细胞在体外的扩增代数有限，所以说，筛克隆不难，但是想要筛到好的克隆就不那么容易了。

xiangchou812

回复 生物化学zy 的帖子4 I& {: v+ e5 X: w; k

3 o! W8 z( Q- E4 w谢谢。很好的方法

xiangchou812

回复 生物化学zy 的帖子% |$ B: d* D2 x1 a+ r7 z
2 _4 K; e" A1 ^# R
玻璃的哪部分？不会是把瓶体砸下来，只留瓶口？用的时候倒过来？这能取到那么好的么？不知你们用的是什么口服液瓶子。
+ q$ A2 M& r3 b: v7 x+ f8 {4 m$ Y5 w" z8 ]$ k% A
欢迎大家继续讨论

xiangchou812

回复 wnavy200299 的帖子) \- k4 W. b& g2 l! M. S7 _1 w+ A

- S: M, i4 c. v% ]非常感谢。这下一目了然。图片还是比文字明了啊。2 W% G3 T- e+ K0 ?3 m+ o# M
不过这种方法好像只有在克隆少的时候管用吧？不过确实是个非常好的方法。
& @* y, V+ h1 t- l& N2 U% k3 m学习了。

xiangchou812

回复 绿雪 的帖子
. f! v4 F2 o3 _0 T: K% u
3 Z7 h+ _  w8 O2 F% ~准确点说应该是打靶的难筛，随机整合的细胞还是相对容易很多的。5 y! j# l; k$ Q0 \/ K, M
就用96孔板，一次转上两三皿细胞，做上两次应该就能筛得到的。