请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

wnavy200299

深海寂寞鱼 发表于 2011-5-17 09:40 1 L9 W7 g8 n! g' H1 i7 U; y
回复 生物化学zy 的帖子* c8 m  m2 m3 G% w- C8 q0 a3 q
; e+ q" @1 k* \0 G# u3 R" Q3 g+ B* z
  to 生物化学zy：

/ t/ j% }/ q+ J: L. r关于克隆环，说了半天，还是整张图片看看，比较直观。
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3 ?2 u1 z, ^0 \' Y至于挑克隆的方法，生物化学zy 已经说过了，
! c. l# ?0 f# v  \在此就不诉说了。但要注意消化时间，长了克隆就有可能养不起来。
- ]# }5 J* R8 S' A$ m前两天刚挑了几个克隆细胞，感觉有几个不太好。
( I1 S/ r% R7 r! O- L" [再就是老生常谈的问题：注意污染！！！！8 E0 c; T- Q! I7 y

% E! E7 o9 }1 c1 c6 @7 Rok！
! E5 t1 P+ H8 h0 Q

wnavy200299

更正“长了克隆就有可能养不起来。”* A9 p: c5 G2 f0 B2 @
挑了的克隆就有可能养不起来。”+ S1 u: e8 |  b  `( w% N0 [

/ D9 A* n7 ?. ]: T

wnavy200299

不管用什么克隆环（玻璃瓶口环、大枪头粗短截断部分等），基本意思和思想是一致的。; M0 G8 j( C" a% i
转染一般用6cm板，转然后（12h后）分板，一般分板比例为1:10~12（1个6cm板分到10~12个6孔板），分板时不加药，次日换液开始加筛选培养液。一般10天左右出现克隆。挑克隆至24孔板培养。ok~

wnavy200299

生物化学zy 发表于 2011-5-18 17:08
$ l$ `/ X+ ~- m% X" I, Z2 R顺便说一下,wnavy200299 是我师兄,哈哈

2 U' }# [+ z- ]/ D- a) W
哈哈，共同为干细胞论坛添砖加瓦~~~