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我的鼠骨髓间充质干细胞用5mlHyclone的0.25%胰蛋白酶   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-5-21 19:49 |显示全部帖子
1. 首先在弃去培养液后要用PBS清洗2次,去除细胞上剩余的血清,如果清洗不干净的话,血清会中止胰酶的消化作用。8 W- Z' `/ ^: }/ \; {
2. 对于比较难消化的细胞,在消化前,用的PBS、胰酶都要温浴到37度,或者是直接放到培养箱中,同时加入胰酶后将培养瓶盖上盖子也放到培养箱中,因为酶的作用效果因温度变化影响很大。
- Z3 \, L2 F& _7 v2 _2 H3. 细胞不要等到长的非常满的时候再传代,细胞密度越大,消化越吃力。
2 n: T4 D3 _5 B4. 终止消化要看大部分都已经圆缩,小部分轻轻摇晃培养瓶的时候已经开始漂浮时迅速中止。
0 n$ J* Y" v( s5. 估计楼主是忘记PBS清洗了。
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