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楼主: future007
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楼主
发表于 2011-9-16 16:38 |显示全部帖子
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首先,第一次和后两次的染色方法一样么?有什么差别?为什么第一次阳性,二三次就阴性了 ?
. |4 ~4 w9 e& J; g+ O: Z) Z: b你的方法中,我有几个疑问:
9 Z  m- z% _2 }& b- j) n. ~②        用2 mL 4%多聚甲醛室温(为什么要固定?)固定细胞40 min,800 r/min离心5 min;2 mL PBS重悬细胞,800 r/min离心5 min。8 N" `) S" t* m+ B
③        用1 mL含0.2% Triton-X100(检测的是胞内的?)和5%血清的PBS重悬细胞,冰上放置10 min,800 r/min离心5 min。/ E2 o# w2 D1 M7 U0 U$ K
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