紧急求助：饲养层处理与干细胞传代

subenjinwo

问题一：我认为可以，首先我们要分析加入丝裂霉素C处理的MEF的作用是什么？个人认为有三大作用：1.可以产生营养因子，是干细胞生长得更好；2.提供LIF，使干细胞保持未分化活性；3.MEF提供了细胞的间隙，环境与整体跟更为相似。为了防止作用2，可以加入LIF，另外的两点缺少了，可能会使细胞生长状态稍差一些。但本人也看到有文献是使用包被明胶即接种干细胞的。因此，不必太担心它的可行性，只要能保证细胞不分化的前提下，让其生存下来，然后尽快的制备MEF,这才是上策。另外细胞多的话，可以冻存几管，这样就万无一失了。O(∩_∩)O~

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问题二：让MEF等待24h，可能是要细胞处于一种稳定的状态，另外可能是24h之后细胞分泌一些营养因子等物质积累达到一定的量了（我认为物质分泌应该不是从24h才开始的），在这两个的基础上，接种干细胞会更容易生长，状态会好一些。结合你的情况，你要看一下干细胞是不是到了非要传代的地步，如果不到，我建议等等。反正时间在等24h又不是很长，你可以先把培养液换换，24h之后再接种。