关于脐带干细胞培养

sunjianhua2000

我5月20日做的脐带干原代培养，大概14天左右（6月3日）镜下观察培养皿底部有7-8个致密细胞克隆团，但感觉没长到整个皿的80%，我就没有进行传代，只是换了液。第19天（6月8日）镜下观察细胞除了克隆团之外有明显增多现象，但还达不到皿的80%，此时细胞克隆团已很密，我就进行了消化传代，比例是1:2，传了2盘，传代时细胞不是很好消化。6月13日镜下观察传代细胞，细胞有增殖但细胞形态不是很好，部分细胞形态不是很规则的梭形，趋向于扁平。我想问一下传代后细胞长的有些慢，且形态不是很好的原因是什么？. E1 j) _& y3 m, ^# O8 r
1 传代时间晚？  2 没加生长因子？我用的是低糖DMEM+20%血清 没加任何生长因子 3 还是脐带间充质干细胞传代后形态就是有所改变？9 E! e0 d! M3 R7 O3 D
请有经验的大侠给予指导，万分感谢

sunjianhua2000

回复 1301918986 的帖子
$ l2 ]/ _7 W& M0 E- s" S, {! O' O" ?/ S) m- R
我做的是组织块培养法。我用的是20*100的皿，当时我的原代只有一盘，传代时间时培养第19天。我消化后传成2盘了，现在细胞已经长4天了，昨天看了感觉形态不是很好，但是感觉到细胞在长。