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[请教] WB条带丑陋,求鉴定,求指点,煮样不充分orDNA粘稠?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-6-13 20:26 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
蛋白浓度过高    每个孔道的上样量不应该超过60ug       过高的话 可能在煮沸的时候出现凝集        建议先定一下量
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沙发
发表于 2011-6-13 20:27 |显示全部帖子
不知道你是用的什么显色方式?

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藤椅
发表于 2011-6-14 10:20 |显示全部帖子
回复 7ubo 的帖子7 M% A9 h5 R+ f. Q+ u/ k' A( ~

/ {4 O9 L! t) `; [( f% u6 t! SBCA 定量就行,不麻烦,有专门的定量剂盒,按照说明做就行。
9 g& ^6 q- F( p$ x( P我记得你说过怕上样量少了显不出条带来,一般Western可以检测出ng级别,挺灵敏的。如果真的是表达量很低的话,可以采用胶片曝光的方式显色,自己控制曝光时间,低表达量蛋白延长曝光时间,有同学曾经曝光30min,效果挺不错的。你右边那个图片做的还行,如果下面那条带是内惨的话,好像有点不齐,说明上样量不大一致。
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