求某个基因的过表达能促进mESC增殖的文章

7ubo

大家知道哪些关于某个基因能促进mESC增殖的文章吗？, a, j; P' y! ]
我的通过Doxycycline在mESC中诱导过表达的一个基因貌似有这个功能，想知道别人会做哪些实验？
: Y/ Y  S2 F* L欢迎并感谢提供文章题目或关键词，谢谢！

张也行

你要是想验证某个基因在ES细胞自我更新中的作用，那一般都是用gain/lose-of-function的方法吧。比如用siRNA KD，再KO这个基因，看看是否对ES细胞的自我更新能力有影响，然后可以再倒入这个基因，或者用探针抑制siRNA，看看能不能逆转这个作用。: ~  S9 p% N- l1 X) U2 ~8 {
如果想发现新的自我更新相关的基因，经费充足的话，可以来一次genome-wide RNAi screen之类的。

可怜的孩子

端粒酶、c-myc都可以，很多文献的。别人做的要更有意义，PNAS上一篇Tet-on控制增殖基因在神经细胞中表达，从而得到了具有增殖能力“干细胞”。你要想检测的话，检测增殖能力就可以，使用Brdu。

7ubo

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; d1 w) s% X- d- j
# D2 N6 h/ [, F谢谢

7ubo

回复 可怜的孩子 的帖子0 q5 u0 g$ P2 [/ O9 X5 ^- P; d
: g8 m" E% h9 Y. S! @
Wnt-mediated self-renewal of neural stem/progenitor cells
2 D0 U; U3 o2 ~& W& i是这一篇吗？刚才我试着搜索了一下。
  S0 b  K# f0 K$ D1 J我想先用流式细胞仪做一下细胞周期，有意义吗？
4 G$ z& L) t& k/ E; B' U4 q$ R: ZBrdU参入实验后续也是用流式细胞仪吗？还是免疫荧光？
/ T4 Z1 K* i0 o% ^/ u* a8 O  J我是在mESC里过表达的，其增殖能力已经很强了，1 x- ^9 E9 B' P+ c& O6 o
检测端粒酶和c-myc用WB还是RT-PCR呢？

可怜的孩子

回复 7ubo 的帖子/ B% F' K1 a( C6 Q3 l' |1 Z
0 n( Y9 Y: N5 w  s# v' ?1 Z, q
文章的具体题目我忘记了，但不是你这一篇，是今年刚发表的，我记得是在论坛上看到的。理论上讲，流式检测细胞数目多，较免疫荧光结果更加可靠，但从发文章角度来说，最好也加上荧光的照片，检测可以都做的，互相印证。检测外源基因是否表达，一是看示踪标记GFP等的表达情况，另外，PCR的方法也说得过去，但个人感觉不是很准确，有条件的话进一步做WB最好。

7ubo

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( ]' d8 L0 R, M1 o/ q5 ~, u/ Q: G0 r  x* Z
好的，谢谢