求原因。PCR怎么会多跑出一个条带？有图......

zhangyan813

看你上面的帖子，你这个应该是做的RT-PCR, 你图上这5个泳道是不同的离子浓度吗？
. q) X( q. i9 |5 s2 i$ q) p% S, G建议你做如下实验：1.，下次做PCR的时候建议你在做样品的同时，加一个水对照，就是样品组加DNA, 对照组不加DNA, 用H2O代替，这样就能知道是不是污染了。电泳结果显示如果水对照组没有条带，则进行下面的2；如果水对照组有条带，则说明你做PCR的时候污染了其他DNA，找到污染源，重新做。2. 如果对照组没有条带，而样品组在不同的离子浓度下还出现了这么亮的非特异性杂带，那应该是你的引物设计有问题，建议重新设计一对引物试试。

zhangyan813

回复 熊猫猫 的帖子
7 g0 f" g9 h- A. t' \3 u  n( f& C+ G& `% c
你们那里有没有DNA和RNA浓度和纯度的仪器，就是紫外分光光度计，提好的RNA可以先上机测一下纯度，要是在2左右就应该很好。要是担心RNA污染DNA的话，可以在提取RNA的过程中加DNase.