求原因。PCR怎么会多跑出一个条带？有图......

熊猫猫

今天第一次跑PCR，没用内参，只跑了目的基因(217kb)，左边是我跑的结果，为什么会多出一个条带来，而且比目的基因还亮些？
4 E1 N6 G+ i( o& F. w还请给位指点啊......

snickle

建议设一个阴性对照试一下看看

殆死悲爱

回复 熊猫猫 的帖子1 s) ^( r$ ^) S8 L0 c8 C' V
$ a. a- q& o% n% q, m
非特异性杂带，可能是引物设计的有问题。我只是个人猜测，因为不知道你的模板是啥？

熊猫猫

回复 snickle 的帖子
- k/ `/ k1 e/ {7 W) {) V5 o% K
  b( f% ]  y; e% y2 |" \% m- e请问什么是阴性对照呢？

dulaiyouyu

看来引物没设计好的样子。跑胶还得有个阴性和阳性对照才好啊。。。

熊猫猫

回复 dulaiyouyu 的帖子
8 F- J. \( h" c  Z4 a3 P
* V$ N/ T" p( m" ~2 W* X请问什么是阴性对照呢？

snickle

阴性对照，不加模板，和你的样品一起扩增跑胶

熊猫猫

回复 snickle 的帖子; ~  e" w. [2 S* w% \5 W8 Y1 h1 G
. V8 d3 A! q7 F9 C; e+ w- i
刚才在网上也看了下，不知道对不对
6 `1 m. @( I5 q阴性对照：逆转录时不加目的RNA，用水代替
+ x/ S' q7 p2 ^3 {阳性对照：逆转录时加目的RNA

jun8013

引物二聚体？

jun8013

应该就是引物二聚体