脐带间充质干细胞的培养基要加什么因子

1301918986

各位大侠，我最近开始培养脐带间充质细胞，每次原代都成功了，可是后面传代以后细胞的状态就很不好。应该是培养基的问题吧，我现在用的是DF12加10%胎牛血清养的，请问是不是还需要加生长因子之类的，浓度是多少？谢谢各位啦！

1301918986

我们是用I型胶原酶消化的，结果终止离心后没有发现细胞。不过我们没有拔胶，我不太清楚这个华通胶到底是什么？

柏林小杨

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组织使用胶原酶消化的，你是不是消化时间过了，一个活细胞也没有吗？

1301918986

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- H" R9 e) w  {! g7 r/ F$ N' W2 v- b# @+ _) A
你的原代用的是消化法吗？用的消化液是什么啊，我用胶原酶消化了一次没做出来。

柏林小杨

回复 1301918986 的帖子, \* i$ Y3 ]/ p' h

& o3 I  t" _; _4 A我的能消化出来啊

柏林小杨

回复 mason658616 的帖子+ w% I% o* U# E, R: L/ a* \

( r/ x( k4 i: [: k- [3 W首先考虑你的培养基是否合适，其次就是细胞的活率问题及接种密度是否合适。

1301918986

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呵呵，谢谢啊，确实很贵啊。

mason658616

回复 柏林小杨 的帖子( i* s# ]: [# W

  w0 e4 ^1 J! M: k& {  I我用酶消化法做的刚接种的时候细胞很多，可就是不贴壁，换两回液基本就没细胞了。这是出了什么问题？

zhanglei1414

加拿大干细胞公司的间充质专用血清，GIBICO的血清，贵的就行，500毫升3000块钱左右的就差不多了

1301918986

回复 zhanglei1414 的帖子9 s6 c1 Y/ x, M

7 M; m2 _9 ?! \# _4 k用好血清啊，我们现在用的是四季青的，你帮忙推荐几种啊，谢谢。