求教人骨髓间充质干细胞提取培养具体方法

zarecol

从骨髓血中提取间充质干细胞的方法和具体步骤，谢谢指教。

lizhiyong

请问是人的骨髓原液吗？1.整个过程需要无菌操作2.将BM与PBS按1:3稀释后，过200目得滤网3.在离心管中加入人淋巴细胞分离液，之后缓慢加入稀释的骨髓液（人淋巴细胞分离液：骨髓液=1:2），2000转/分离心20分钟，中间层云雾状，即为单个核细胞，吸取放入另一离心管中，加入2倍体积的PBS洗去多余的人淋巴细胞分离液（2200转/分离心6分钟），弃上清，重悬细胞，计数，种于培养皿中。4.若是做大鼠的BMMSC，先无菌取出股骨与胫骨，用PBS冲出骨髓，进行上面的步骤。请试试，有问题联系我。。。

zarecol

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8 p8 {- S4 l: R  ?! L! p9 _这是密度梯度离心法，全骨髓法呢？细胞计数完了以多少比例接入培养皿中呢？

luckzhuo1982

回复 zarecol 的帖子; B. s% Y# H& P( S$ I; Y" e- x
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一般要是全骨髓培养方法的话我采用的是10的8次方进行培养，三天后就能看见长出形态的细胞

huyuhai888

回复 lizhiyong 的帖子$ n! g: l, k: F; P" b- _& j/ A+ L
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您好   这种方法培养的骨髓干细胞长的好么？我也用这种方法，但是细胞没有贴壁，是用白血病患者的骨髓

lizhiyong

回复 huyuhai888 的帖子8 y+ g3 C6 P0 l7 @) M3 G
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绝对没问题，注意细节，原代可多等几天，10-14天。再做两次试试

突击兵之小土豆

请问楼上在2楼提到的BM是什么啊？刚接触该行业，不太懂。望指教！

蓝O海

我先回答楼上的，BM（Bone marrow ）是骨髓。* E: x/ Y; h$ Y& M/ W/ N, L