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本帖最后由 zerollx 于 2011-7-13 23:43 编辑
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3 t4 F o8 K% e- q. i回复 alephine 的帖子$ w" o" y; u4 ^; e
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1、成骨诱导:
" L& I& u/ u, b0 O (1)、组织学染色:Alizarin Red-S染色矿化结节,其中矿化结节的形成也许也是成骨细胞高增值率的一个原因,因为其又为细胞提供了附着表面。9 L9 l) h' ? @
(2)、诱导10天后,几乎所有的细胞均表达一型胶原,可以免疫组化检测之。! t0 Y) x. \, o5 {8 e
(3)、RT-PCR检测特异性基因的表达:OCN(骨钙素),OPN(骨桥蛋白)
+ v( Z4 O+ F5 d 注意:OPN是其早期表达的一种物质,一型胶原的生成说明成骨的发生,但这二者都不是成骨细胞所特有的,OCN是成骨细胞晚期特异性分泌的物质,它的分泌也说明细胞已达到了终端分化了。
& L6 J- N1 S" r7 `2、成脂诱导:0 X% i# t, s2 L; {# C
(1)组织学染色:油红染色。
( f% |( F" w$ F* A/ h* q0 w* P(2)、RT-PCR:检测脂肪细胞特异性表达的基因:PPAR-γ 2 和 LPL,一般在诱导后2周检测。
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