脂肪干细胞分化标志

alephine

  最近在做脂肪干细胞的诱导分化实验，不知道其成骨和成脂分化的途径上分别有哪些比较好的基因或者蛋白可供检测之用的？2 z: {/ s& i  o: S. ?. T
  谢谢各位了。

zerollx

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6 Y" W" u5 |0 u: c回复 alephine 的帖子  j7 M% h$ _3 C9 J; l
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1、成骨诱导：
0 w7 M/ [# U4 a  K     （1）、组织学染色：Alizarin Red-S染色矿化结节，其中矿化结节的形成也许也是成骨细胞高增值率的一个原因，因为其又为细胞提供了附着表面。
- l4 [7 H2 i) q: s( b( @' {+ E0 s     （2）、诱导10天后，几乎所有的细胞均表达一型胶原,可以免疫组化检测之。! H6 {9 h3 n2 ~. M& |/ v$ c+ {
     （3）、RT-PCR检测特异性基因的表达：OCN（骨钙素），OPN（骨桥蛋白）
: U4 L$ U6 J1 m          注意：OPN是其早期表达的一种物质，一型胶原的生成说明成骨的发生，但这二者都不是成骨细胞所特有的，OCN是成骨细胞晚期特异性分泌的物质，它的分泌也说明细胞已达到了终端分化了。
" H! O4 P% b$ Q( l1 {% f+ S2、成脂诱导：. v& N: W. c7 x" e
（1）组织学染色：油红染色。
3 b# ~3 M1 S/ @! e4 @) {& f（2）、RT-PCR:检测脂肪细胞特异性表达的基因：PPAR-γ 2 和 LPL，一般在诱导后2周检测。: f5 \+ `% h+ R- h" K
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