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[请教] 免疫荧光染色用PBS和TBS有无区别   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-7-28 11:42 |显示全部帖子
细胞的免疫荧光染色,我都用PBS,因为细胞培养用品都是用超纯水配制,所以做细胞的免疫荧光染色时用的PBS我也是用的超纯水,给你一个配方:
2 x2 L! A, L% @# s# O3 VKCl                          0.2g/L
7 T1 P$ `9 x* ]9 h4 W( }9 M. xKH2PO4                  0.2g/L4 O" f2 m+ P! {6 T6 r
NaCl                        8.0g/L- o# E2 q8 D' U4 j) L, V2 J1 B
Na2HPO4.7H2O      2.16g/L3 B* Z$ o6 E) q" ]* S. x
用超纯水定容到1L 即可;最好是现用现配,4摄氏度保存。
' @" X, u2 ?* c, c- V8 c
! f! \% E3 _+ H6 y  
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沙发
发表于 2011-7-28 11:44 |显示全部帖子
以上配方中所列的试剂用国产的分析纯即可。如果没有超纯水,也可以用三蒸水代替。

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藤椅
发表于 2011-7-28 12:17 |显示全部帖子
本帖最后由 oucflora 于 2011-7-28 12:42 编辑
5 X' z, ~( `+ {1 [# [
oucflora 发表于 2011-7-28 11:42
" M( X% x5 w. W, Z. t8 S4 T细胞的免疫荧光染色,我都用PBS,因为细胞培养用品都是用超纯水配制,所以做细胞的免疫荧光染色时用的PBS我 ...
: c8 M+ G, T7 n6 h* e" Z
4 _% P- n0 x6 C
其实关于PBS的配方问题我以前查阅过很多资料,不过在刘爱平主编的《细胞生物学荧光技术原理和技术》(中科大出版社出版)这本书中介绍说PB(phosphate buffer)为磷酸缓冲溶液,只有Na2HPO4和NaH2PO4两种成分。而PBS(phosphate buffered saline)称为磷酸缓冲生理盐水,是在PB的基础上添加了NaCl等成分。) i7 {( {% W2 p/ g: R
在PB和PBS的选择上,个人认为对于活细胞的漂洗工作最好用PBS,细胞被固定后就没有太多的要求了。& Z5 w1 |1 H' J/ i' Z: ?
上面我列举的PBS的配方来源于薛庆善的《体外培养原理与技术》这本书。咱们论坛有电子版,下载地址:http://www.stemcell8.cn/thread-36261-1-1.html
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