与个体基因型致敏DC共培养可增强CIK对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性

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主题：与个体基因型致敏DC共培养可增强CIK对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性7 K9 n) U+ J3 u+ [) y
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说明：原文来自haematologica，干细胞之家新闻小组成员deron翻译（转帖请注明）' o6 ~# X3 ]4 U" T8 o+ B  [9 l

9 k) r$ o9 r7 V: w. F9 ~翻译内容：
" J) _( I$ U' R: u, V很多学者报道多发性骨髓瘤（MM）特异性抗原致敏的树突状细胞（DC）在体内外应用的研究，这种DC细胞用以对MM进行免疫治疗。数据显示包括T细胞在内，整个固有免疫系统均对MM有毒性反应。这里，我们检测了细胞因子诱导杀伤性（CIK）细胞对骨髓瘤细胞的细胞毒作用。这种多克隆效应群体包含T细胞、NK细胞和NKT细胞。
$ V# K  f  E) @5 Y设计和方法4 I3 S% |1 C  e! }0 K( G
从MM病人白细胞层或血液中培养出的CIK细胞，与自体基因型致敏的DC细胞共培养。乳酸脱氢酶释放试验检测细胞毒作用。* W$ `& C' B" j4 n3 U. P
结果
4 s" c2 H% @$ ?2 ]  qCIK细胞能够以低的效应/靶细胞比率溶解MM细胞。在与特异性致敏DC细胞共培养后，上述效应明显增强（83.8%的溶解率，效应/靶细胞比为16：1）。用干扰素γ分泌型磁珠分选后，CIK细胞以较低的效应/靶细胞比（5：1）达到最高的细胞毒作用。在完全自体环境中富集一位MM患者的CD138+细胞后，CIK细胞也呈现出高细胞杀伤活性（54.4%溶解率，效应/靶细胞比为6：1）。有趣的是，(CIK)没有针对骨髓CD138-片段的细胞杀伤活性。
: H% H- ?# C$ P( ?说明和结论
+ t. w1 C, K& r# |4 {/ x3 h用效应细胞的混杂群体组分，我们能够激活固有和适应性免疫系统对抗骨髓瘤细胞。CIK细胞对MM细胞表现出高溶解活性，且这种活性在（CIK）与抗原特异性致敏DC细胞共培养后，能够得到加强。4 t: C, C, D9 A3 h7 x7 P

( E& E1 p  a2 b& G: ~原文：   

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关于DC&CIK培养的protocol，这篇也算是很经典的了3 ]/ U2 R- m4 J4 T; V/ Y4 F

/ d8 {" S/ i1 t, Y- p+ YDC培养
  S& w' r3 ^4 M; u; N用ficoll密度梯度离心法，从健康供者或从MM患者血液中分离出外周血淋巴细胞。血液抽取遵循当地伦理委员会方案标准。细胞以5×106/ml的密度，在含10%自体热灭活血清的1640液中，六孔板中贴附1小时。未贴壁细胞收集用以培养CIK细胞。贴壁细胞在2ml/孔的培养基中培养，培养基成分为10%自体热灭活血清、750U/ml粒/巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和500U/ml白介素4。% g* \3 ~. H6 H/ W4 ~/ e3 D

2 g9 ^) [4 l1 dCIK细胞培养- \' j% B! o2 J4 j
0天        ，干扰素γ1000U/ml。
2 b, m3 v/ z/ I- f( h9 }, m+ X24h孵育后，50ng/ml抗CD3，100U/ml白介素1，300U/ml白介素2。; @! e! c1 {4 _7 n5 k
细胞在37℃、5%二氧化碳环境中培养，每3天以3×106/ml的密度补充新鲜培养基和IL-2。" S; ?  i% u& ~' \1 i3 f9 ^
完全培养基组分：10%FBS、25mM Hepes、100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素。
( f+ x& h! x* f+ R- [
/ Y4 a% L' y' U4 ]) H" ~( |- @研究者也在结果中观察到CIK细胞可以以低效应/靶细胞比率杀伤MM细胞，在与致敏DC共培养后可以明显增强这种杀伤效应