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[请教] 关于细胞消化的相关实验操作   [复制链接]

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优秀会员 金话筒

楼主
发表于 2011-8-18 09:26 |显示全部帖子
对于消化的问题真的是个经验的活,不同细胞消化后呈现的状态也不太相同。一定要一边消化(一般都会放置于37度、5%CO2的培养箱中若干分钟,依细胞的不同而不同),一边在镜下观察,如MEF一般胞质回缩、细胞间隙增大 ,即认为消化完全,终止消化;hESc则是在观察到克隆边缘透亮并卷起,即消化完成。" o* t  r3 F! V% r
此外,在消化完成后的吹打,一定要注意不要产生气泡,缓慢吸取,向外吹时要在枪头中留有少部分液体,这样可避免气泡的产生,也不影响镜下观察!
9 d# i: X$ `4 S再次,胰酶的存放条件,别反复冻融,可以分装到小的离心管中冻存,用时置于4度,但合理安排实验,尽快用完!! q6 P  L9 e( `7 t# e# p2 g* T  E
祝好运!              
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