请问有哪位用到shRNA做干扰啊

zorro

    请问有哪位用到shRNA做干扰啊？怎么设计呢，有什么资料吗？多谢啦

yglky

google搜搜就很多资料了。另外，现在很多生物公司都提供shRNA构建服务，你可以看下上海的生物公司。

yglky

google搜搜就很多资料了。另外，现在很多生物公司都提供shRNA构建服务，你可以看下上海的生物公司。

runsong

你是要用载体表达shRNA，还是用合成的shRNA做瞬转？

seanboy

回复 zorro 的帖子
6 a- M- b  |5 k3 s1 P( {' W4 f9 B/ E/ x2 {# e1 t
你用什么载体?

zorro

回复 seanboy 的帖子# R. D+ p+ G" C4 J2 y5 I
% }/ z- S8 ?2 U" o& \
脂质体  慢病毒 和293t什么细胞吧  具体的我也是学习中   有资料什么的啊

seanboy

设计的话，与载体直接相关的。序列你可以从sigma公司卖的shRNA序列找。然后设计正反义DNA链退水，再连到你的载体上去。

runsong

6 h  l5 g5 g. ~; z$ h0 a/ F; F" U8 H  M% _6 u$ q  U& _
如果你想用慢病毒表达shRNA的话那么你的工作就可以拆分为两部分。
4 X9 j& k  z) C（1）、siRNA的设计。- U! K4 k# L' T5 @1 A8 c
（2）、将可以表达shRNA的序列装入慢病毒载体。  f0 D) [2 n6 U" h' f

0 u) O9 m1 }2 k0 C对于（1），我没经验，没有发言权。你可以参考 芷瞻 的帖子 http://www.stemcell8.cn/thread-32624-1-1.html ，即在sigma的产品里找。
2 B; S% E9 x' [, d对于（2），我查过一些资料，设计过两个方案。你可以用pll3.7，参考a，b两篇文献：也可以用模拟miRNA-30的体内自然发生过程的载体，参考文献c。- W8 J& b& a' J+ T1 P
两个载体我都有，不懂得话可以联系我。) @/ ~% B1 R3 k$ E4 X
' l$ |, F; M3 S
这个帖子你可以去看看 http://www.stemcell8.cn/thread-24732-1-1.html$ c2 M! [2 Y2 K8 b% b. k* B& V
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