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[请教] 请问有哪位用到shRNA做干扰啊 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-28 16:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
    请问有哪位用到shRNA做干扰啊?怎么设计呢,有什么资料吗?多谢啦

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沙发
发表于 2011-8-28 21:23 |只看该作者
google搜搜就很多资料了。另外,现在很多生物公司都提供shRNA构建服务,你可以看下上海的生物公司。
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藤椅
发表于 2011-8-28 21:24 |只看该作者
google搜搜就很多资料了。另外,现在很多生物公司都提供shRNA构建服务,你可以看下上海的生物公司。

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板凳
发表于 2011-8-29 14:55 |只看该作者
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你是要用载体表达shRNA,还是用合成的shRNA做瞬转?
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报纸
发表于 2011-8-29 22:58 |只看该作者
回复 zorro 的帖子4 f* o9 p; q1 a

- L. g3 l; m* o6 r: W* ^你用什么载体?

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地板
发表于 2011-8-30 12:06 |只看该作者
回复 seanboy 的帖子
; g# E( g# J1 B) S$ y
8 u* y* G5 {+ ~! ~! b# Z: Z脂质体  慢病毒 和293t什么细胞吧  具体的我也是学习中   有资料什么的啊
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发表于 2011-9-1 15:48 |只看该作者
设计的话,与载体直接相关的。序列你可以从sigma公司卖的shRNA序列找。然后设计正反义DNA链退水,再连到你的载体上去。
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发表于 2011-9-2 22:10 |只看该作者
本帖最后由 runsong 于 2011-9-2 22:12 编辑 + x1 w. P( S. P) H
0 H2 p# y8 B# f6 z: W- y$ x7 B
如果你想用慢病毒表达shRNA的话那么你的工作就可以拆分为两部分。* t; `5 R2 p. u3 }, j
(1)、siRNA的设计。2 F. _4 [8 Q8 U3 q
(2)、将可以表达shRNA的序列装入慢病毒载体。
& G  P/ A1 x1 z. }; l" u
) ~. r$ M+ t2 d0 ?; W. Y对于(1),我没经验,没有发言权。你可以参考 芷瞻 的帖子 http://www.stemcell8.cn/thread-32624-1-1.html ,即在sigma的产品里找。/ q% F2 C$ i3 g* \+ c. T
对于(2),我查过一些资料,设计过两个方案。你可以用pll3.7,参考a,b两篇文献:也可以用模拟miRNA-30的体内自然发生过程的载体,参考文献c。8 Z6 a$ Y7 @; e+ E1 ~# c! j: C  B
两个载体我都有,不懂得话可以联系我。" ?8 ?0 ~( z. C1 x9 z; l: n
# G0 d5 I+ o5 r& ]7 c
这个帖子你可以去看看 http://www.stemcell8.cn/thread-24732-1-1.html: W8 m# X8 r; _+ m2 q3 G5 k
# u+ R  t  Q# L. Z% d

pll37cloning.pdf

94.37 KB, 下载次数: 25

a

pLL3.7_stemloop_design.pdf

84.77 KB, 下载次数: 19

b

Lessons from Nature microRNA-based.PDF

221.88 KB, 下载次数: 25

c

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