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[请教] 请问有哪位用到shRNA做干扰啊 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-29 14:55 |显示全部帖子
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你是要用载体表达shRNA,还是用合成的shRNA做瞬转?
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沙发
发表于 2011-9-2 22:10 |显示全部帖子
本帖最后由 runsong 于 2011-9-2 22:12 编辑 + f1 R3 K2 n2 y5 m# Q6 v6 c

  o9 `( L8 X( }+ o" g; a. F2 z  n9 v如果你想用慢病毒表达shRNA的话那么你的工作就可以拆分为两部分。
: W2 k9 S6 y( t6 m) ?(1)、siRNA的设计。
! D1 p* C# K4 x* z: m( ~(2)、将可以表达shRNA的序列装入慢病毒载体。: R( ~. Z* t+ H. ?) W9 ^% w
$ @0 m) _+ I* |! [; a
对于(1),我没经验,没有发言权。你可以参考 芷瞻 的帖子 http://www.stemcell8.cn/thread-32624-1-1.html ,即在sigma的产品里找。
' V& U+ l' d. H对于(2),我查过一些资料,设计过两个方案。你可以用pll3.7,参考a,b两篇文献:也可以用模拟miRNA-30的体内自然发生过程的载体,参考文献c。
% Y: B9 ]& F4 U+ s4 f: a. v. h两个载体我都有,不懂得话可以联系我。
  A0 v9 s7 d4 n$ q  R: C$ U9 `
4 J! w6 N3 u; ?& E% J: l这个帖子你可以去看看 http://www.stemcell8.cn/thread-24732-1-1.html
. x9 |" a* _7 P( u9 b
# x: B, `5 I) G  M3 B

pll37cloning.pdf

94.37 KB, 下载次数: 25

a

pLL3.7_stemloop_design.pdf

84.77 KB, 下载次数: 19

b

Lessons from Nature microRNA-based.PDF

221.88 KB, 下载次数: 25

c

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