人iPS培养可以用已经建立的小鼠MEF细胞系吗？

bigsnow55

看到上海细胞库有小鼠MEF细胞系，名称：BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞（http://www.cellbank.org.cn/detail_1.asp?id=31），好像是转入了一些病毒什么的。; K. I( n8 J0 {& ~5 j- G2 F
请问如果想培养人的iPS或ES细胞，可以用这种已经建好的MEF细胞系吗？1 O2 i% R$ h" }1 k7 \2 `
另外，iPS培养对于MEF的基因背景是否有要求，如BalB/C，C57或者昆明小鼠，有无区别？

jj.jianjia

你们要自己照辐射吗？我用的是公司买的用伽马射线照过的。

huangcong1988

回复 jj.jianjia 的帖子) L' w7 Z5 X7 \* e; D

. q, p; P5 q8 u+ }- U0 N. o8 }你是说制作饲养层吧？用丝裂霉素C也行吧？

jj.jianjia

也是可以滴。。。

jj.jianjia

也是可以滴。。。

bigsnow55

谢谢大家！不知道有没有谁用细胞系做饲细胞层？:)/ K. Z( v! Z5 U7 ?
一般野生型MEF用第三代的，那永生化的细胞系用多少代比较合适呢？

haijing12585

回复 bigsnow55 的帖子( z( p8 T% H4 Q2 B

# @. a: H% {. v* X应该是可以的，有人也用STO细胞作为饲养层来培养iPS的

bigsnow55

haijing12585 发表于 2011-9-22 23:01
4 Z6 {( q9 g& v/ x. ?' v1 Y4 B) B回复 bigsnow55 的帖子. f0 D$ e) N! ^8 [. Q

% H3 k9 R- h% t! T5 h* r应该是可以的，有人也用STO细胞作为饲养层来培养iPS的

" r: g, G) |6 E, l  K" v谢谢！我刚才搜索看到了，在ATCC有这种细胞。

juan880929

可以买他们的，也可以自己做% a" C0 A, s4 G( @. Q( F
做feeder最好的小鼠品系细胞是CF1，但是国内没有这种小鼠，所以一般ICR或者昆明白小鼠的胎儿成纤维细胞就可以，如果人的胚胎干细胞状态好的话，这两种品系小鼠的饲养层一般没有问题，没有必要花钱买细胞系

bigsnow55

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% M) @  z3 m0 r' M9 C, ]
( ?. G- v7 V2 X, b# S. c谢谢juan880929！回答很专业！7 O# h" ?* Q4 c8 E. z
我现在在用C57 BL/6小鼠做MEF，不知道是否合适，请不吝指教，谢谢！: I8 `- r: p" \. l6 [$ k0 K