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楼主: runsong
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大家包装的慢病毒滴度是多少(不包括浓缩)   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-3-25 09:29 |显示全部帖子
回复 ying 的帖子+ K+ D4 m. S, E; }' K
/ D/ B# U; X6 |, D) d% M# u
我的也是差不多10的6,浓缩后差不多浓缩100倍,但是浓缩后还要加入一定体积的培养基啊,这样不是等于又把病毒给稀释了么?
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沙发
发表于 2012-3-28 08:32 |显示全部帖子
回复 ying 的帖子
& X, m+ b7 n# B* B( M1 G! ?: e3 m/ |2 E" E9 [; G/ x
不是,我的意思是说,在你浓缩完病毒后,倒掉上清,底下沉淀里面加新鲜培养基,加了培养基之后把沉淀吹打混匀,然后再用来感染细胞,可能我没有表述清楚吧,我是说,加了培养基后,病毒不就被稀释了么?
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藤椅
发表于 2012-3-29 10:05 |显示全部帖子
本帖最后由 huangcong1988 于 2012-3-29 10:06 编辑 3 W- O! O  u# W; w! z+ R

0 k' i' |% x" i+ Z5 u: ?回复 ying 的帖子& u2 m1 t4 o7 n. w. c* t) \
! c- ^8 g3 M& D- x$ {
100ml?这个离心起来怕是比较麻烦,您是在10ml(或者15买了,亦或者50ml)管里面一次一次离心弃上清么?一般来说,我们是直接15ml上清液(于50ml离心管中)离心,估计最后那剩下的一坨坨大概150ul,这算是浓缩了一百倍,然后再加1ml左右培养液,所以觉得最终只是浓缩了10几倍
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板凳
发表于 2012-6-4 20:22 |显示全部帖子
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回复 ying 的帖子( f' y1 \( k8 t1 Y. |2 h

9 ^! B( u6 X# \; G' J3 C6 b我也是用低速离心来浓缩,不过我用的是PEG8000,50ml离心管,一般我是5mlPEG8000母液,然后加15ml病毒上清,然后离心。你一次离35ml上清液,那你不是包毒的时候要转好几个大皿么?工作量确实够大的。还有,你这个浓缩后的滴度我保守估计能到10的九次方左右,直接用?
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